[發明專利]一種利用微生物發酵生產DHA的方法

有效

• 申請號: 201611270522.9
• 申請日: 2016-12-30
• 公開（公告）號: CN106636235B
• 公開（公告）日: 2020-08-04
• 發明（設計）人: 王炳榮;文昌;陳必欽;張斌;韓雯;龐毅;李丹;詹光煌
• 申請（專利權）人: 內蒙古金達威藥業有限公司;廈門金達威集團股份有限公司
• 主分類號: C12P7/64
• 分類號: C12P7/64;C11B1/06;C11B3/10;C11B3/12;C12R1/645
• 代理公司: 中國國際貿易促進委員會專利商標事務所 11038
• 代理人: 劉海羅

1.一種培養用于生產DHA的微生物的方法，其中：

從發酵罐培養的36－60小時開始，將溶解氧飽和度控制在5％－10％；和

從發酵罐培養的36－60小時開始，不再加入氮源或者將氮源的加入量減少50％以上；

其中，

所述發酵罐培養還包括在發酵罐培養起始的12－36小時，進行分罐培養的步驟；并且

所述用于生產DHA的微生物為裂殖壺菌。

2.根據權利要求1所述的培養方法，其中：

從發酵罐培養的40－56小時開始，將溶解氧控制在5％－10％，和/或

從發酵罐培養的40－56小時開始，不再加入氮源。

3.根據權利要求1所述的培養方法，其中：

從發酵罐培養的44－52小時開始，將溶解氧控制在5％－10％。

4.根據權利要求1所述的培養方法，其中：

從發酵罐培養的46－50小時開始，將溶解氧控制在5％－10％。

5.根據權利要求1所述的培養方法，其中：

從發酵罐培養的48小時開始，將溶解氧控制在5％－10％。

6.根據權利要求1所述的培養方法，其中：

從發酵罐培養的44－52小時開始，不再加入氮源。

7.根據權利要求1所述的培養方法，其中：

從發酵罐培養的46－50小時開始，不再加入氮源。

8.根據權利要求1所述的培養方法，其中：

從發酵罐培養的48小時開始，不再加入氮源。

9.根據權利要求1所述的培養方法，其中，在控制溶解氧飽和度為5％－10％之前，溶解氧飽和度為30％－50％。

10.根據權利要求1所述的培養方法，其中，發酵液的pH為6.0－7.0。

11.根據權利要求10所述的培養方法，其中，發酵液中葡萄糖的濃度保持1－5g/L。

12.根據權利要求1所述的培養方法，其中，所述氮源為氨水。

13.根據權利要求12所述的培養方法，其中，所述氨水為25％－45％的氨水。

14.根據權利要求12所述的培養方法，其中，所述氨水為35％－45％的氨水。

15.根據權利要求12所述的培養方法，其中，所述氨水為40％的氨水。

16.根據權利要求1所述的培養方法，其中，所述發酵罐培養還包括在發酵罐培養起始的24小時，進行分罐培養的步驟。

17.根據權利要求1所述的培養方法，其中，所述分罐培養是分為兩個或更多個發酵罐進行發酵罐培養。

18.根據權利要求1所述的培養方法，其在發酵罐培養之前，還包括接種和種子擴大培養的步驟。

19.根據權利要求18所述的培養方法，其中，所述種子擴大培養包括一級種子擴大培養和二級種子擴大培養。

20.根據權利要求19所述的培養方法，其中，所述一級種子擴大培養包括下述步驟：

按照0.4％－1％的接種量將搖瓶種子液接入裝有滅菌后培養基的一級種子罐中，培養溫度25℃－32℃，通氣量1－2vvm，罐壓0.02－0.05MPa，攪拌轉速50－100rpm，培養30－35h，完成一級種子擴大培養。