[發明專利]一種基于熒光免疫層析技術的定量檢測計算方法

在審

• 申請號: 201611267448.5
• 申請日: 2016-12-31
• 公開（公告）號: CN106841133A
• 公開（公告）日: 2017-06-13
• 發明（設計）人: 張繼堯;夏果;裘楨煒;陳迪虎;應玉龍;洪津
• 申請（專利權）人: 必歐瀚生物技術（合肥）有限公司
• 主分類號: G01N21/64
• 分類號: G01N21/64
• 代理公司: 合肥天明專利事務所(普通合伙)34115
• 代理人: 金凱

1.一種基于熒光免疫層析技術的定量檢測計算方法，其特征在于，包括以下步驟：將滴加有待測樣本溶液的熒光免疫試紙條插入熒光免疫分析儀中，依次經過LED光源照射、濾光片濾光處理、光電探測器檢測、電信號處理、AD轉換處理、基線校正、L-M算法處理、面積計算、濃度計算的過程。

2.根據權利要求1所述的一種基于熒光免疫層析技術的定量檢測計算方法，其特征在于：所述的面積計算是將原始曲線擬合為兩個標準的高斯曲線，通過計算擬合后的兩條曲線的振幅系數比值從而計算出原有的曲線面積比值。

3.根據權利要求1所述的一種基于熒光免疫層析技術的定量檢測計算方法，其特征在于：所述基線校正選用最小二乘法。

4.根據權利要求1所述的一種基于熒光免疫層析技術的定量檢測計算方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)在熒光免疫試劑條上滴加待測樣本溶液，靜置一段時間后，插入熒光免疫分析儀中進行檢測；

(2)針對試劑條中熒光標記物的光譜，選擇合適的LED光源，啟動LED光源照射試劑條；

(3)針對熒光標記物的激發波長和發射波長，選擇對應的激發光濾光片和發射光濾光片，濾除背景光、雜散光的干擾；

(4)利用光電探測器將檢測到的熒光信號轉換成電信號；

(5)對光電探測器獲取的微弱電流信號進一步處理，先通過I/V轉換電路將電流信號轉化為電壓信號，再通過帶通濾波放大電路進行放大，增大信噪比；然后通過檢波電路以獲取高精度的放大的模擬電信號；

(6)使用AD轉換器，將采集處理放大后的模擬電信號轉換為數字信號，并且將轉換來的數字信號按照每個檢測點的檢測順序拼成一條原始檢測數據的采集樣品曲線；

(7)將AD轉換后的數據進行基線校正，采用最小二乘法擬合來進行基線校正以消除曲線漂移造成的影響；

(8)將基線校正后的原始檢測數據進行L-M處理；

(9)經過上述算法和校正流程處理過后，形成了T峰和C峰的高斯曲線，將形成的兩個高斯曲線寫為振幅系數與面積為1的高斯曲線的乘積，而高斯曲線的面積比就是高斯曲線公式中的振幅系數的比值，同時也將比值的結果記為光強特征值；

(10)根據T/C光強特征值與濃度標準曲線，計算出T/C比值對應的待測樣品濃度。

5.根據權利要求4所述的一種基于熒光免疫層析技術的定量檢測計算方法，其特征在于：步驟(2)所述選擇合適的LED光源指的是選擇發射波長同熒光物質的激發波長相同的LED光源。