[發明專利]瓶內塑型快速培育難扦插繁殖的擬石蓮屬商品小盆栽方法

有效

• 申請號: 201611250513.3
• 申請日: 2016-12-29
• 公開（公告）號: CN106613988B
• 公開（公告）日: 2018-08-14
• 發明（設計）人: 王麗花;瞿素萍;吳學尉;王繼華;張藝萍;楊秀梅;張麗芳;蘇艷;許鳳
• 申請（專利權）人: 云南省農業科學院花卉研究所
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 北京慕達星云知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 11465
• 代理人: 崔自京

1.瓶內塑型快速培育難扦插繁殖的擬石蓮屬商品小盆栽方法，其特征在于包括以下步驟：

(1)優質塑型生根叢苗的誘導和培育

①外植體的選擇與消毒

選擇無病蟲害、無損傷的擬石蓮屬植物離體葉片為外植體，于室溫陰涼干燥處晾過夜，第二天用濃度為1％v/v洗潔精水溶液洗1次后，置于自來水下沖洗0.5～1.0h，瀝干表面水分，置于超凈工作臺，先用75％v/v酒精浸泡10s～15s，再用添加有Tween-20的0.05％w/w氯化汞溶液浸泡5～6min，無菌水洗2～3min，最后用添加有Tween-20的2.5％w/w次氯酸鈉溶液浸泡3～5min，無菌水洗3次～5次，每次洗2～3min，獲得無菌離體葉片，于無菌條件下，切除葉片中上部組織，保留從葉片基部之上、長度為1.5cm～2.5cm、含葉基部腋芽分生組織的葉片組織為無菌誘導外植體，備用；所述添加有Tween-20的0.05％w/w氯化汞溶液為在100～120毫升的0.05％w/w氯化汞溶液添加2～3滴Tween-20，所述添加有Tween-20的2.5％w/w次氯酸鈉溶液為在100～120毫升的2.5％w/w次氯酸鈉溶液中添加2～3滴Tween-20；

②再生芽苗誘導

將無菌誘導外植體斜插于盛有誘導培養基的組培瓶內，于23℃～25℃、空氣相對濕度30％～50％的條件下暗培養10d～15d，后轉為光培養，光培養條件為：溫度23℃～25℃，空氣相對濕度30％～50％，光照強度1000～1200lx，光照時間12～16h/d，培養10d～25d，所述誘導培養基為MS+ZT 1.0～2.0mg/L+NAA 0.1～0.2mg/L+硫酸腺嘌呤30～50mg/L+蔗糖25～30g/L+瓊脂6.0～7.0g/L,pH值為5.5～6.0；

③再生芽苗塑型增殖培育

將通過步驟(1)②誘導出的叢生不定芽從葉基部以2～4個芽為一個芽叢切下，且留0.3～0.5cm的葉原基，進行第一次塑型，第一次塑型后的每一個芽叢轉接于一個盛有增殖培養基的組培瓶內，在培養條件為：溫度23～25℃，空氣相對濕度30％～50％，光照強度1500～2000lx，光照時間12～16h/d的條件下培養20～30天；所述第一次塑型為：在每一個分切好的芽叢基部四周用滅菌接種刀尖等距或非等距縱向輕劃3～5刀微傷口，微傷口大小長為0.1～0.2cm、深為0.02～0.05cm；所述增殖培養基為：MS+ZT 0.2～0.3mg/L+NAA 0.1～0.2mg/L+硫酸腺嘌呤30～50mg/L+蔗糖25～30g/L+活性炭300～500mg/L+瓊脂6.0～7.0g/L,pH值為5.5～6.0；

④壯苗生根和第二次塑型

無菌條件下，取步驟(1)③所培養的苗團，以3～5個單株苗為一叢切分為一個苗叢，具體用無菌接種刀插入苗團的縫隙豎直向下切分為第二次塑型；后再將切分好的苗叢放入盛有壯苗生根培養基的組培瓶內，在與步驟(1)③相同的培養條件下培養25d～30d，所述壯苗生根培養基為：1/2MS+NAA 0.3～0.5mg/L+蔗糖25～30g/L+活性炭300～500mg/L+瓊脂6.0～7.0g/L，pH值為5.5～6.0；

(2)塑型生根叢苗移栽入盆馴化和后期標準化培育商品小盆栽

①塑型生根叢苗移栽

將步驟(1)④培養獲得的生根瓶苗置于過渡溫室內，在自然溫度和自然光照條件下放置5～7d后，取出植株，洗除培養基，放于陰涼處晾去表面水分，移栽到裝有無土栽培基質的花盆，澆透水；所述無土栽培基質用草炭土∶珍珠巖∶鹿沼土按2:1:1體積比的比例混合而成；移栽后放入溫室，花盆上方搭建遮光率為70％的遮陽網，此后每天早晚各噴霧1次水，保持溫室內溫度為18～25℃，溫室內空氣相對濕度為85％以上；

②標準化培育商品小盆栽

步驟(2)①移栽成活后，撤去遮陽網，保持溫室內溫度為18～28℃，空氣相對濕度保持為60～65％，每3～4天澆一次透水，每15天澆施一次2000倍液復合肥，所述復合肥中N﹕P₂O₅﹕K₂O的質量比為17﹕17﹕17；每周噴施一次70％甲基托布津可濕性粉劑1500倍液；發現蚜蟲時，噴施10％吡蟲啉可濕性粉劑1000倍液。

2.根據權利要求1所述的瓶內塑型快速培育難扦插繁殖的擬石蓮屬商品小盆栽方法，步驟(2)①移栽所用的花盆為高15cm、盆底內徑8cm、盆口內徑10cm。

3.根據權利要求1所述的瓶內塑型快速培育難扦插繁殖的擬石蓮屬商品小盆栽方法，步驟(1)②所述的將無菌誘導外植體斜插于盛有誘導培養基的組培瓶內，所述斜插的斜度為30°～45°。