[發明專利]細胞生長因子組合物及其制備方法、美容制劑，以及用途

在審

• 申請號: 201611248130.2
• 申請日: 2016-12-29
• 公開（公告）號: CN106580718A
• 公開（公告）日: 2017-04-26
• 發明（設計）人: 陳玉容;項琪;貝煜;黃亞東
• 申請（專利權）人: 廣州遠想生物科技有限公司;廣州暨南大學醫藥生物技術研究開發中心
• 主分類號: A61K8/11
• 分類號: A61K8/11;A61K8/64;A61K8/73;A61Q19/08;A61P17/02
• 代理公司: 北京超凡志成知識產權代理事務所(普通合伙)11371
• 代理人: 李丙林

技術領域

本發明涉及化妝品以及醫學美容的技術領域，具體而言，涉及細胞生長因子組合物及其制備方法、美容制劑，以及用途。

背景技術

富血小板血漿(platelet-rich plasma，PRP)是將動物或人的全血經過離心后得到的富含高濃度血小板的血漿，在其中加入凝血酶后可變為膠狀物，因此也被稱為富血小板凝膠或富血小板白細胞凝膠(platelet-leukocyte-enriched gel,PLG)。PRP中含有大量的生長因子。研究發現，PRP未被激活時，其血小板中α顆粒釋放的生長因子量較少，而被激活后其生長因子釋放量則大大增加，并且激活后的PRP促增殖作用明顯強于未激活組。并且隨著凝血酶濃度的增加，PRP釋放生長因子的量也隨之增加。提取制備的缺點。

PRP被激活后，血小板中α顆粒釋放的生長因子能通過跨膜受體結合到靶細胞膜的外表面，跨膜受體誘導并激活內源性蛋白信號后，進一步激活細胞內的第二信號，后者能夠誘導細胞內多種基因的表達，如基質的形成、膠原蛋白的合成等。另外在血小板的激活過程中，纖維蛋白原轉變成的纖維蛋白也能促進創傷組織的愈合，其作用主要表現在參與凝血過程、收縮創面并為細胞的增殖提供三維空間結構等。PRP凝膠是指血小板被激活后釋放生長因子的同時，其纖維蛋白原轉變為纖維蛋白并連接成網，所形成的乳白色膠狀物，其具有一定強度和黏附性。

富血小板血漿具有以下幾方面優點：(2)自體的富血小板血漿不可能出現傳染病交叉感染或免疫抑制等現象；(3)使用自體血液不存在醫學倫理學問題；(4)加速組織的修復與再生，可促進毛細血管的新生；(6)加速慢性創面上皮的形成。即便如此，PRP還是存在著一些亟待解決的問題。

然而，目前還存在以下問題有待解決：①PRP的制備尚無統一標準，需建立一套高效穩定的制備方法，標準化制備的PRP可以為其應用于研究與臨床提供可靠的質量保證。②PRP濃度與促組織再生之間的量效與時效關系尚未完全闡明。③PRP中各生長因子的活性、細胞分子生物學機制及相互間的作用尚未完全闡明。④不能長時間起作用，應用在術區后眾多生長因子多在第一個小時大量的釋放，缺乏中期或長期的效果觀察；⑤較快速度溶解，不能起到良好支撐作用；⑥白細胞隨之濃縮后的作用及安全性尚不清晰；⑦由于只能使用自體PRP，其應用推廣及產業化受到限制，有學者提出同種異體PRP取代自體PRP，這樣可以減少病人的二次創傷，但目前來說還是受到異體排斥、交叉傳染以及倫理等因素的限制。

發明內容

有鑒于此，本發明一方面在于提供一種細胞生長因子組合物，該細胞生長因子組合物能較好地對細胞生長因子進行緩釋控制。

一種細胞生長因子組合物，其包含纖維蛋白膠和由殼聚糖微球包覆細胞生長因子所形成的細胞生長因子復合殼聚糖微球，所述細胞生長因子復合殼聚糖微球的含量為50～200μg，以纖維蛋白膠的質量為1g計。

進一步地，所述纖維蛋白膠包含10～50mg纖維蛋白原，50～200IU凝血酶、1～20IU第VIII因子、0.01～0.2M鈣離子，以纖維蛋白膠的質量為1g計。

進一步地，所述細胞生長因子復合殼聚糖微球的直徑為0.5～5μm。

進一步地，所述細胞生長因子選自PDGF、VEGF、TGF-β1、EGF和IGF-1中的一種或二種以上；

優選地，所述細胞生長因子包含10～30ng PDGF、0.1～1ng VEGF、10～150ng TGF-β1、0.2～0.5ng EGF和10～50ng IGF-1，以纖維蛋白膠的質量為1g計。

本發明另一方面在于提供一種細胞生長因子組合物的制備方法，該制備方法所獲得的細胞生長因子組合物能較好地對細胞生長因子進行緩釋控制。

一種如上述細胞生長因子組合物的制備方法，包括以下步驟：

(1)將殼聚糖分散于酸液、表面活性劑和硫酸鹽，形成空殼聚糖微球；

(2)將細胞生長因子和所述空殼聚糖微球分散于酸液中，形成細胞生長因子復合殼聚糖微球；

(3)將纖維蛋白膠和所述細胞生長因子復合殼聚糖微球混合。

進一步地，步驟(1)中：

所述酸液為冰醋酸溶液；

優選地，所述酸液的質量分數為1～5wt％；

優選地，所述表面活性劑為吐溫-80；

優選地，所述硫酸鹽的質量分數為15～25wt％；

優選地，所述分散之后還由先之后依次包括離心分離、用水洗滌干燥。

進一步地，步驟(2)中：