[發(fā)明專利]低能耗酶解殼聚糖制備液體殼寡糖的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201611247543.9
• 申請(qǐng)日: 2016-12-30
• 公開（公告）號(hào): CN106755208B
• 公開（公告）日: 2020-03-24
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 班宜民;韓國(guó)濤;沈宏;何萍
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 山東愛果者生物技術(shù)有限公司
• 主分類號(hào): C12P19/26
• 分類號(hào): C12P19/26;C12P19/14;C12M1/40;C12M1/02
• 代理公司: 北京遠(yuǎn)大卓悅知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11369
• 代理人: 胡茵夢(mèng)

1.一種低能耗酶解殼聚糖制備液體殼寡糖的方法，其特征在于，包括以下步驟：

步驟一、將610～630重量份的水加入反應(yīng)釜中，再向反應(yīng)釜中加入13～26重量份的琥珀酸和6.5～13重量份的乙酰丙酸，琥珀酸與乙酰丙酸的質(zhì)量比為2:1，之后攪拌均勻，并調(diào)節(jié)pH值至4.0～4.2，得到復(fù)合溶劑，備用；

步驟二、向淡紫擬青霉的粗酶液中加入木瓜蛋白酶，得到木瓜蛋白酶的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為8～10％的復(fù)合降解酶，備用；

步驟三、將質(zhì)量為所述復(fù)合溶劑質(zhì)量0.3～0.8％的復(fù)合降解酶加入反應(yīng)釜中，在溫度為42～47℃下，攪拌5～10min，之后將質(zhì)量為所述復(fù)合溶劑質(zhì)量3～8％的脫乙酰基80～90％的殼聚糖緩慢加入反應(yīng)釜中，殼聚糖與復(fù)合降解酶的質(zhì)量比為10:1，在42～47℃下，保溫100～150min后，加入質(zhì)量為所述復(fù)合溶劑質(zhì)量4％，且質(zhì)量分?jǐn)?shù)為30％的雙氧水，攪拌下反應(yīng)20h后，升溫至60℃，再攪拌60～80min，然后加入質(zhì)量為反應(yīng)釜中液體總質(zhì)量1％的亞硫酸鈉，攪拌反應(yīng)10～15min，再升溫煮沸5～8min，經(jīng)多級(jí)離心過濾，即得液體殼寡糖。

2.如權(quán)利要求1所述的低能耗酶解殼聚糖制備液體殼寡糖的方法，其特征在于，所述步驟一中用氫氧化鉀或氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH值。

3.如權(quán)利要求1所述的低能耗酶解殼聚糖制備液體殼寡糖的方法，其特征在于，所述木瓜蛋白酶與粗酶液混合前的酶活力為1000萬U/g。

4.如權(quán)利要求1所述的低能耗酶解殼聚糖制備液體殼寡糖的方法，其特征在于，所述復(fù)合降解酶中木瓜蛋白酶的酶活力為80萬U/g。

5.如權(quán)利要求1所述的低能耗酶解殼聚糖制備液體殼寡糖的方法，其特征在于，所述反應(yīng)釜包括：

殼體，其為內(nèi)部中空的圓柱體形，所述殼體的頂部設(shè)置有進(jìn)料口，所述殼體的底部設(shè)置有進(jìn)水口，所述殼體的側(cè)壁上設(shè)置有出水口；

第一隔板，其為圓筒體形，所述第一隔板的外徑小于所述殼體的內(nèi)徑，所述第一隔板設(shè)置在所述殼體內(nèi)，所述第一隔板的頂部與所述殼體的頂部固定連接；

第二隔板，其為內(nèi)部中空，且底部敞開的圓柱體形，所述第二隔板的外徑小于所述第一隔板的內(nèi)徑，所述第二隔板設(shè)置在所述第一隔板內(nèi)，且與所述第一隔板同軸設(shè)置，所述第二隔板的底部與所述第一隔板的底部齊平，所述第二隔板的頂部與所述殼體的頂部不接觸，所述進(jìn)料口位于所述第一隔板和所述第二隔板圍成的區(qū)域的上方；

底板，其為圓環(huán)形，且沿水平方向設(shè)置，所述底板的外徑等于所述第一隔板的外徑，所述底板的內(nèi)徑等于所述第二隔板的內(nèi)徑，所述底板與所述第一隔板和所述第二隔板的底部固定連接，所述底板封住所述第一隔板的底部和所述第二隔板的底部間的縫隙；

旋轉(zhuǎn)軸，其沿豎直方向，且與所述第二隔板同軸設(shè)置，所述旋轉(zhuǎn)軸的底部穿過所述殼體的頂部，并與所述第二隔板的頂部不接觸，所述旋轉(zhuǎn)軸的頂部位于所述殼體外；

至少一根連接桿，其環(huán)所述旋轉(zhuǎn)軸設(shè)置，所述連接桿為倒L形，所述連接桿由水平設(shè)置的第一桿體和豎直設(shè)置的第二桿體組成，所述第一桿體上遠(yuǎn)離所述第二桿體的一端與所述旋轉(zhuǎn)軸固定連接，所述第二桿體位于所述第一隔板和所述第二隔板之間；

至少一根橫桿，其與所述連接桿的數(shù)量相等，且一一對(duì)應(yīng)，所述橫桿沿水平方向設(shè)置在所述第一隔板和所述第二隔板之間，且與所述底板相貼合；

至少一對(duì)刷桿，一根橫桿對(duì)應(yīng)一對(duì)刷桿，所述刷桿沿豎直方向設(shè)置，一對(duì)刷桿分別設(shè)置在所述橫桿的兩端，一對(duì)刷桿的底部分別與橫桿的兩端固定連接，一對(duì)刷桿分別與所述第一隔板的內(nèi)側(cè)壁和所述第二隔板的外側(cè)壁相貼合；

多根固定桿，每對(duì)刷桿和與其相對(duì)應(yīng)的第二桿體間均設(shè)置有多根固定桿；

出料管，其一端與所述底板固定，且與所述第一隔板和所述第二隔板圍成的區(qū)域連通，另一端穿過所述殼體的底部，并與所述殼體的底部固定連接。

6.如權(quán)利要求5所述的低能耗酶解殼聚糖制備液體殼寡糖的方法，其特征在于，所述固定桿的一端與第二桿體固定連接，所述固定桿的另一端朝下，并與刷桿固定連接。