[發明專利]蛹蟲草固態發酵生產富耐熱蛋白酶及蟲草素的飼料添加劑的方法

有效

• 申請號: 201611246827.6
• 申請日: 2016-12-29
• 公開（公告）號: CN107189947B
• 公開（公告）日: 2021-01-01
• 發明（設計）人: 高兆建;楊杰;李同祥;曹澤虹;李勇;沈彬彬;曹建冬;顧強
• 申請（專利權）人: 徐州鴻宇農業科技有限公司
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12P19/40;C12N9/58;A23K50/30;A23K10/12;A23K10/37;C12R1/645
• 代理公司: 宿遷市永泰睿博知識產權代理事務所(普通合伙) 32264
• 代理人: 徐曉燕

本發明涉及一種蟲草飼料添加劑的制備方法,該方法采用既產生耐熱蛋白酶又高產蟲草素的蛹蟲草作為固態發酵生產菌株。通過發酵菌種的準備、三角瓶固態發酵、曲盤固態發酵、發酵后蛋白酶解等工藝步驟制備蟲草飼料添加劑。曲盤固態發酵獲得的干曲中蛋白酶活力達到12941U/g，蟲草素含量為：780mg/100g。發酵產物制得的飼料添加劑最大限度的保留了蟲草中的活性功能成分，另外，還含有高活性的耐熱蛋白酶，以及經過該酶水解而得到的功能性活性多肽和氨基酸。該添加劑能更好的促進動物生長、提高飼料的轉化率而降低成本，而且可以提高動物免疫力和抗病性，提高成活率而降低成本。

技術領域

本發明屬于蛹蟲草加工技術領域，具體屬于一種蛹蟲草固態發酵生產富耐熱蛋白酶及蟲草素的飼料添加劑方法。

背景技術

近幾年，隨著人們生活水平不斷提高，對畜產品的需求量也越來越多。但是，由于熱衷于追求畜產品的產量，往往忽略了畜產品質量安全性的問題，尤其是獸藥及藥物添加劑在畜產品中的殘留對人類健康危害的問題。因此綠色天然的飼料添加劑，如天然無毒害作用、無藥物殘留、無抗藥性、能促進動物生長、能有效而經濟地提高動物的生產性能、提高飼料利用率和畜產品質量、養殖效益高、提高動物機體免疫力的這一類飼料添加劑成為市場發展方向。現代的一些研究表明，蟲草人工發酵的菌絲體的主要藥理藥化成分基本類似于傳統蟲草。蛹蟲草菌絲體中除含有蟲草多糖外，蛹蟲草具有豐富的活性物質，如蟲草多糖、蟲草素、蟲草酸，氨基酸，SOD酶等，具有抗腫瘤、抗氧化和衰老、抗炎抗菌、抗疲勞、抑制病毒生長、增強免疫力等多種藥理作用和滋補功能，是具有開發潛力的一大藥用寶典。目前已經有大量的蟲草開發的產品，如各類的蟲草保健品等。以蛹蟲草為發酵菌株，固態發酵，開發蟲草飼料添加劑則是綠色添加劑的其中的一個新的發展方向。開發利用蟲草類產品做飼料添加劑，在國外尚無報道，國內蟲草飼料添加劑方面，與本專利相近的僅有中國專利CN97107712.6，但不同之處非常明顯。前者發酵用的菌株同本發明區別顯著，且產生的耐熱蛋白酶的數量有限。

本發明所用菌株能夠產生大量的耐熱蛋白酶，另一方面發酵的培養基原料以及發酵工藝，都存在顯著的區別。

發明內容

針對背景技術提出的不足，本發明提供一種蛹蟲草固態發酵生產富耐熱蛋白酶及蟲草素的飼料添加劑的方法，使用新型的發酵的培養基原料以及新的發酵工藝，使培養出富耐熱蛋白酶及蟲草素，富耐熱蛋白酶再通過曲盤固態發酵等工藝，制成無公害的飼料添加劑。該飼料添加劑具有提高豬的免疫力、調節腸道健康、提高豬的抗病能力，并進一步提高料重比，增加飼料利用率。

本發明的技術解決方案：

一、固態發酵菌種的制備

以蛹蟲草HYCM12為菌株固態發酵法制備富耐熱蛋白酶及蟲草素飼料添加劑的方法，包括以下步驟：

一種蛹蟲草菌株(Cordyceps militaris) HYCM12，已于2016年11月11日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心CGMCC（地址為：中國北京市朝陽區北辰西路1號院3號，郵編100101），保藏編號：CGMCC No. 13179。該菌株是本發明的發明人經過復雜的篩選后得到的。

步驟1，菌種活化：首先，取保藏的蛹蟲草HYCM12試管菌株原種接種于培養皿活化培養基上，20～26℃培養箱避光培養5～7d，得到一級種子。

活化斜面培養基：馬鈴薯200 g，清洗切碎，加水1000 mL煮至沸騰保持20 min，紗布過濾，濾液再加葡萄糖20 g，無機鹽液1mL，瓊脂15 g繼續煮沸，充分溶解后分裝試管，每個試管約4 mL，培養基在121℃下進行滅菌，滅菌時間為20 min，滅菌完成后將試管擺成斜面，斜面在室溫下冷卻后儲存備用。

步驟2，液體菌種：