[發(fā)明專利]一種山羊角的檢測方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201611245964.8
• 申請日: 2016-12-29
• 公開（公告）號: CN108254449A
• 公開（公告）日: 2018-07-06
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 程顯隆;魏鋒;馬雙成;張倩倩;李明華
• 申請（專利權(quán)）人: 中國食品藥品檢定研究院
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 北京康思博達(dá)知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11426
• 代理人: 汪送來

一種山羊角的檢測方法，其特征在于，所述檢測方法包括采用高效液相色譜?質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)(HPLC?MS)進(jìn)行山羊角檢測的步驟，其中，以山羊角對照藥材為對照品，以m/z 673.3±0.5(雙電荷)→764.0±0.5(單電荷)和m/z 673.3±0.5(雙電荷)→920.0±0.5(單電荷)作為檢測離子對，該檢測方法操作步驟簡單，專屬性強(qiáng)，準(zhǔn)確度高，可重復(fù)性好，使得山羊角在臨床療效和安全性等方面也更有保障。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種山羊角的檢測方法。

背景技術(shù)

山羊角具有清熱、鎮(zhèn)驚、散瘀止痛的功效，可以作為活血藥、止痛藥、清熱藥，是一味不可多得的療效好功能多的中藥。但是現(xiàn)行檢測山羊角的方法存在缺陷：對山羊角的性狀進(jìn)行觀察的方法，該方法準(zhǔn)確度非常低。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明為了克服現(xiàn)有山羊角檢測方法的缺點，提供了一種準(zhǔn)確度高、可行性好、重現(xiàn)性好的山羊角的檢測方法。

本發(fā)明的第一個方面是提供一種山羊角的檢測方法，其特征在于，所述檢測方法包括采用高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)(HPLC-MS)進(jìn)行山羊角檢測的步驟，其中，以山羊角對照藥材為對照品，以m/z 673.3±0.5(雙電荷)→764.0±0.5(單電荷)和m/z 673.3±0.5(雙電荷)→920.0±0.5(單電荷)作為檢測離子對。

優(yōu)選地，上述檢測方法中，所述高效液相色譜的條件為：固定相為十八烷基硅烷鍵合硅膠或辛烷基硅烷鍵合硅膠，流動相A選自甲酸、乙酸、甲酸水溶液或乙酸水溶液中的至少一種，優(yōu)選自0.1％(v/v)甲酸的水溶液或0.1％(v/v)乙酸的水溶液；流動相B選自乙腈、甲醇或甲酸的乙腈溶液中的至少一種，優(yōu)選為0.1％(v/v)甲酸的乙腈溶液，進(jìn)行梯度洗脫。

更優(yōu)選地，所述高效液相色譜的條件為：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為固定相，以0.1％(v/v)甲酸的水溶液為流動相A，以0.1％(v/v)甲酸的乙腈溶液為流動相B，梯度洗脫：0～25分鐘，A 95％→80％，B 5％→20％；25～40分鐘，A 80％→50％，B 20％→50％；40～41分鐘，A 50％→1％，B 50％→99％；41～45分鐘，A 1％→1％，B 99％→99％。

優(yōu)選地，上述檢測方法中，所述質(zhì)譜采用質(zhì)譜檢測器，電噴霧正離子模式(ESI⁺)，進(jìn)行多反應(yīng)監(jiān)測。

優(yōu)選地，上述檢測方法包括將所述山羊角進(jìn)行酶解的步驟。

更優(yōu)選地，所述酶解包括向山羊角中依次加入尿素，二硫蘇糖醇(DTT)，碘乙酰胺(IAA)和酶的步驟。

更進(jìn)一步優(yōu)選地，所述酶解包括如下步驟：向山羊角中加入尿素，再加入DTT，60±5℃加熱30±5min，冷卻，加入IAA，黑暗中放置30±5min，加堿稀釋至10ml，加酶于37℃反應(yīng)12h以上。

優(yōu)選地，上述檢測方法中，所述酶選自胃蛋白酶、胰蛋白酶、胰酶、中性蛋白酶、堿性蛋白酶、木瓜蛋白酶中的至少一種，優(yōu)選胰蛋白酶。

優(yōu)選地，上述檢測方法中，所述堿為碳酸氫銨(NH₄HCO₃)。

優(yōu)選地，上述檢測方法包括如下步驟：

(1)將山羊角按所述的酶解的步驟制得供試品溶液；

(2)取山羊角對照藥材按所述的酶解的步驟制得對照品溶液；

(3)分別吸取供試品溶液和對照品溶液，注入高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀測定，以m/z 673.3±0.5(雙電荷)→764.0±0.5(單電荷)和m/z 673.3±0.5(雙電荷)→920.0±0.5(單電荷)作為檢測離子對。

更優(yōu)選地，上述檢測方法包括如下步驟：