[發明專利]一種大黃蟄蟲丸的指紋圖譜檢測方法

在審

• 申請號: 201611242593.8
• 申請日: 2016-12-29
• 公開（公告）號: CN106814146A
• 公開（公告）日: 2017-06-09
• 發明（設計）人: 吳麗;陳志鵬;李偉東;劉曉;張希瓊
• 申請（專利權）人: 南京中醫藥大學
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 南京經緯專利商標代理有限公司32200
• 代理人: 楊海軍

1.一種大黃蟄蟲丸的指紋圖譜檢測方法，其特征在于，所述指紋圖譜檢測方法，包括以下步驟：

(1)供試品溶液制備：取大黃蟄蟲丸粉末，精密稱定，置圓底燒瓶中，精密加入甲醇或乙醇，稱定重量，超聲提取，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，離心取上清液，用0.22μm微孔濾膜過濾取濾液，制成供試品溶液；

(2)對照品溶液的制備：精密稱取芍藥苷、蘆薈大黃素、大黃酸、大黃素、大黃酚、大黃素甲醚、毛蕊花糖苷對照品，用甲醇或乙醇溶解，分別配置成適宜濃度的對照品儲備液；

(3)高效液相色譜法測定本品的對照指紋圖譜：取5～10批大黃蟄蟲丸供試品在適當的色譜條件下進樣，測得各批次供試品的指紋圖譜，以這些指紋圖譜為基礎，用相似度軟件計算獲得共有模式作為本品的對照指紋圖譜；

(4)取對照品溶液按步驟(3)相同的色譜條件進樣，測得各對照品溶液的高效液相圖譜；

(5)高效液相色譜法測定供試品溶液指紋圖譜：取步驟(1)供試品溶液按步驟(3)相同的色譜條件進樣，測得供試品溶液的指紋圖譜；并根據步驟(4)所得對照品溶液的高效液相圖譜歸屬各色譜峰；

(6)將步驟(5)得到的供試品溶液指紋圖譜和步驟(3)得到的對照指紋圖譜用相似度軟件評價。

2.根據權利要求1所述的大黃蟄蟲丸的指紋圖譜檢測方法，其特征在于，步驟(3)色譜柱：Thermo C18色譜柱(規格)流動相：A相甲醇-B相0.1％甲酸水溶液，梯度洗脫；流速1.0ml/min；檢測波長270nm；柱溫：30℃；進樣量10μL。

3.根據權利要求3所述的大黃蟄蟲丸的指紋圖譜檢測方法，其特征在于，

步驟(3)梯度洗脫程序如下表：

4.根據權利要求1至3任一項所述的大黃蟄蟲丸的指紋圖譜檢測方法，其特征在于，步驟(1)中供試品溶液制備方法為：取大黃蟄蟲丸粉末1g，精密稱定，置圓底燒瓶中，精密加入甲醇25mL，稱定重量，超聲提取40min，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，離心取上清液，用0.22μm微孔濾膜過濾取濾液，制成供試品溶液。

5.根據權利要求4所述的大黃蟄蟲丸的指紋圖譜檢測方法，其特征在于，步驟(2)對照品溶液的制備：精密稱取芍藥苷、蘆薈大黃素、大黃酸、大黃素、大黃酚、大黃素甲醚和毛蕊花糖苷對照品各2g，用甲醇溶解，分別配置成1mg/mL的對照品儲備液。