[發明專利]對FAP-α酶、還原環境雙敏感的粒徑收縮型的腫瘤滲透性納米系統的制備方法及其應用

有效

• 申請號: 201611238615.3
• 申請日: 2016-12-28
• 公開（公告）號: CN106729746B
• 公開（公告）日: 2019-11-22
• 發明（設計）人: 侯琳;張振中;郝麗莎;張銀玲;鄭亞珍
• 申請（專利權）人: 鄭州大學
• 主分類號: A61K47/69
• 分類號: A61K47/69;A61K47/64;A61K31/704;A61P35/00;C08G83/00
• 代理公司: 41113 鄭州天陽專利事務所(普通合伙)
• 代理人: 蔡文雅<國際申請>=<國際公布>=<進入

1.一種對FAP-α酶、還原環境雙敏感的粒徑收縮型的腫瘤滲透性納米系統的制備方法，其特征在于，阿霉素通過二硫鍵作為連接臂與聚酰胺胺相連形成還原敏感型納米粒，然后將此納米粒通過對FAP-α敏感的多肽連接臂相連形成對FAP-α、還原環境雙敏感的粒徑收縮型的腫瘤滲透性納米系統，所述的二硫鍵為3，3’-二硫代二丙酸或2，2’-二硫代二乙酸，多肽連接臂為蘇氨酸-絲氨酸-甘氨酸-脯氨酸-天冬酰胺-谷氨酰胺或AC-天冬氨酸-丙氨酸-蘇氨酸-甘氨酸-脯氨酸-丙氨酸或丙氨酸-絲氨酸-甘氨酸-脯氨酸-天冬酰胺-谷氨酰胺或蘇氨酸-甘氨酸-脯氨酸-丙氨酸；具體包括以下步驟：

（1）合成還原敏感型的納米粒：

①稱取作為連接臂的二硫鍵3，3’-二硫代二丙酸或2，2’-二硫代二乙酸10mg-2g，分別加入2.0~15.0ml乙酰氯，置于燒瓶中，在65℃油浴下回流2~6h，將反應物進行濃縮后加入3~4倍預冷的乙醚，冷卻析晶，真空干燥，得3，3’-二硫代二丙酸酐或2，2’-二硫代二乙酸酐；

②稱取0.01~1.0mmol阿霉素、0.01~1.0mmol4-二甲氨基吡啶和0.01~1.0mmol步驟①中制得的酸酐分別溶解于0.5~15.0ml反應溶劑A中，將阿霉素和4-二甲氨基吡啶溶液混合，加入20~200μl三乙胺，向上述溶液中加入酸酐溶液，在25~45℃下避光反應8~24h，反應停止后加入3~4倍預冷的乙醚，冷卻析晶，真空干燥，得羧基化的阿霉素；

③稱取羧基化的阿霉素20~100mg、1-乙基-（3-二甲基氨基丙基）碳二亞胺100~250mg和羥基琥珀酰亞胺60~180mg分別溶解于5~25mL反應溶劑A中，先將羧基化的阿霉素和1-乙基-（3-二甲基氨基丙基）碳二亞胺溶液混合，反應0.5~3h，再加入羥基琥珀酰亞胺溶液，反應0.5~4h，得活化的羧基化阿霉素，取聚酰胺胺10~150mg溶解于3~12mL反應溶劑A中，加10~200μl三乙胺，再將活化的羧基化阿霉素和聚酰胺胺溶液混合，在20~45℃下氮氣保護反應6~26h，反應結束后用截留分子量3500的透析袋透析2天，透析液為超純水，每3~6小時換一次水，冷凍干燥，得還原敏感型的納米粒；

所述的反應溶劑A為二甲基亞砜、N,N-二甲基甲酰胺的一種或兩種的混合物；

（2）合成對FAP-α、還原環境雙敏感的納米粒：

稱取作為連接臂的多肽鏈2~100mg、1-乙基-（3-二甲基氨基丙基）碳二亞胺 20~200mg和羥基琥珀酰亞胺 15~180mg分別溶解于2~20mL反應溶劑B中，然后將多肽連接臂和1-乙基-（3-二甲基氨基丙基）碳二亞胺溶液混合，反應0.5~2.5h，再加入羥基琥珀酰亞胺溶液，反應0.5~3.5h，得活化的多肽連接臂，取負載了阿霉素的還原敏感型的納米粒10~200mg溶解于5~25mL反應溶劑B中，再將活化的多肽連接臂和上述納米粒溶液混合，在20~40℃下氮氣保護8~25h，反應結束后用截留分子量3500~8000的透析袋透析2天，透析液為超純水，每3~6h換一次水，冷凍干燥，得FAP-α、還原環境雙敏感的納米粒；即對FAP-α酶、還原環境雙敏感的粒徑收縮型的腫瘤滲透性納米系統；

所述的反應溶劑B為二甲基亞砜、N,N-二甲基甲酰胺的一種或兩種的混合物。