[發(fā)明專利]一種DNA免疫吸附劑及其制備方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201611236523.1
• 申請日: 2016-12-28
• 公開（公告）號: CN108246264B
• 公開（公告）日: 2020-12-15
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 董凡;邵柯
• 申請（專利權(quán)）人: 健帆生物科技集團股份有限公司
• 主分類號: B01J20/26
• 分類號: B01J20/26;B01J20/30;A61M1/36
• 代理公司: 北京汲智翼成知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11381
• 代理人: 陳曦;杜梁緣

1.一種DNA免疫吸附劑的制備方法，其特征在于包括如下步驟：

1）含有醛基的聚苯乙烯基大孔吸附樹脂的制備：

以乙烯基苯甲醛單體和苯乙烯類單體為原料，以多乙烯基單體為交聯(lián)劑，再加入致孔劑和引發(fā)劑，混合均勻，制成混合有機相，將混合有機相加入到分散介質(zhì)中，機械攪拌，待混合有機相在分散介質(zhì)溶液中形成一定大小的均勻液滴后，進行懸浮聚合；反應(yīng)結(jié)束后，水洗至水洗液澄清，用丙酮抽提12-36h，再水洗至無丙酮味，抽濾，得到含有醛基的聚苯乙烯基大孔樹脂；

其中，所述乙烯基苯甲醛單體占單體總重量的5%-40%；

所述苯乙烯類單體占單體總重量的5-40%；

所述多乙烯基單體占單體總重量的55-80%；

所述致孔劑的用量為單體總重量的70%-250%；

所述引發(fā)劑的用量為單體總重量的0.5%-1.5%；

所述分散介質(zhì)與混合有機相的體積比為1-3∶1；

所述分散介質(zhì)由分散劑和水組成；其中分散劑占分散介質(zhì)質(zhì)量百分比為0.5%-2%；

具體操作時，懸浮聚合過程為：加熱升溫至70-75℃，聚合3-6小時，升溫至78-82℃反應(yīng)5-8小時，再升溫至85-90℃，繼續(xù)反應(yīng)4-8小時后停止反應(yīng)；

2）DNA配基接枝固載：

取小牛胸腺DNA溶解于0.2mol/L pH＝7.5-8.0的Tris-HCl緩沖溶液中，配制成濃度為0.5-2mg/mLDNA溶液，將步驟1）所得的含醛基的聚苯乙烯基大孔吸附樹脂加入到相當(dāng)于樹脂質(zhì)量1-5倍的上述DNA溶液中，在60-80℃下反應(yīng)5-18h，得到接枝DNA配基的大孔吸附樹脂。

2.如權(quán)利要求1所述的DNA免疫吸附劑的制備方法，其特征在于：

步驟1）所述含有醛基的聚苯乙烯基大孔樹脂的粒徑范圍為0.4-2mm。

3.如權(quán)利要求1所述的DNA免疫吸附劑的制備方法，其特征在于：

步驟1）所述乙烯基苯甲醛單體為3-乙烯基苯甲醛或4-乙烯基苯甲醛中的一種或者兩種。

4.如權(quán)利要求1所述的DNA免疫吸附劑的制備方法，其特征在于：

步驟1）所述苯乙烯類單體選自苯乙烯、甲基苯乙烯、乙基苯乙烯的一種或兩種。

5.如權(quán)利要求1所述的DNA免疫吸附劑的制備方法，其特征在于：

步驟1）所述多乙烯基單體為二乙烯基苯或二乙烯基甲苯。

6.如權(quán)利要求1所述的DNA免疫吸附劑的制備方法，其特征在于：

步驟1）所述致孔劑為芳烴、高級醇、烷烴、酯類中的一種或兩種或三種，其中，所述芳烴為甲苯或二甲苯，所述高級醇為丁醇、己醇或環(huán)己醇，所述烷烴為正庚烷，所述酯類為乙酸丁酯、乙酸乙酯或丁酸丁酯。

7.如權(quán)利要求1所述的DNA免疫吸附劑的制備方法，其特征在于：

步驟1）所述引發(fā)劑為有機過氧化物；所述分散劑為明膠、聚乙烯醇或羧甲基纖維素。

8.如權(quán)利要求7所述的DNA免疫吸附劑的制備方法，其特征在于：

所述有機過氧化物為過氧化苯甲酰、過氧化-2-乙基己酸叔丁酯或過氧化-2-乙基己酸叔戊酯。

9.如權(quán)利要求1所述的DNA免疫吸附劑的制備方法，其特征在于：

步驟1）所述含有醛基的聚苯乙烯基大孔樹脂的比表面為300-1100m² /g、平均孔徑為4-20nm，醛基含量為0.5-4mmol/g。

10.如權(quán)利要求1所述的DNA免疫吸附劑的制備方法，其特征在于：

步驟2）所得固載DNA配基的大孔吸附樹脂中DNA的固載量為0.3-4mg/mL。

11.一種根據(jù)權(quán)利要求1-10中任意一項所述制備方法制備的DNA免疫吸附劑。