[發(fā)明專利]一種降低細胞質鎘積累的短肽,其編碼基因和用途有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201611234858.X | 申請日: | 2016-12-28 |
| 公開(公告)號: | CN108250280B | 公開(公告)日: | 2021-06-01 |
| 發(fā)明(設計)人: | 龔繼明;羅勁松 | 申請(專利權)人: | 中國科學院分子植物科學卓越創(chuàng)新中心 |
| 主分類號: | C07K14/415 | 分類號: | C07K14/415;C12N15/29;C12N15/82;C12N5/10;C12Q1/6895;A01H5/00;B01J20/24 |
| 代理公司: | 上海專利商標事務所有限公司 31100 | 代理人: | 韋東 |
| 地址: | 200032 上*** | 國省代碼: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 降低 細胞質 積累 編碼 基因 用途 | ||
1.一種多肽,其特征在于,所述多肽選自:
(1)SEQ ID NO:3所示的多肽;
(2)SEQ ID NO:3第32-80位所示的多肽;
(3)由(1)或(2)所述多肽與用于促進(1)或(2)所述多肽的分泌、表達和/或純化的多肽序列組成的多肽;
其中,SEQ ID NO:3中第70位氨基酸殘基為纈氨酸。
2.如權利要求1所述的多肽,其特征在于,(3)所述的用于促進多肽的分泌、表達和/或純化的多肽序列選自信號肽、末端延伸、蛋白A和標簽序列。
3.如權利要求2所述的多肽,其特征在于,所述標簽序列為GST、麥芽糖E結合蛋白、6His或Flag。
4.一種多核苷酸分子,其特征在于,所述多核苷酸分子選自:
(1)編碼權利要求1-3中任一項所述多肽的多核苷酸分子;和
(2)(1)所述多核苷酸分子的互補序列。
5.一種核酸構建物,其特征在于,所述核酸構建物含有權利要求4所述的多核苷酸分子。
6.如權利要求5所述的核酸構建物,其特征在于,所述核酸構建物是克隆載體或表達載體。
7.如權利要求6所述的核酸構建物,其特征在于,所述表達載體適于經由農桿菌轉入植物中。
8.一種遺傳工程化的宿主細胞,其特征在于,所述宿主細胞:
(1)含有相對于該宿主細胞而言為外源的權利要求4所述的多核苷酸序列;
(2)含有權利要求6的表達載體;和/或
(3)表達權利要求1-3中任一項所述的多肽。
9.如權利要求8所述的宿主細胞,其特征在于,所述宿主細胞為農桿菌。
10.一種調控植物鎘積累的方法,所述方法包括在所述植物中過表達選自以下的多肽:
(a)SEQ ID NO:3所示的多肽;
(b)SEQ ID NO:3第32-80位所示的多肽;
(c)由(a)或(b)所述多肽與用于促進(a)或(b)所述多肽的分泌、表達和/或純化的多肽序列組成的多肽。
11.如權利要求10所述的方法,其特征在于,(c)所述的用于促進多肽的分泌、表達和/或純化的多肽序列選自信號肽、末端延伸、蛋白A和標簽序列。
12.如權利要求11所述的方法,其特征在于,所述標簽序列為GST、麥芽糖E結合蛋白、6His或Flag。
13.如權利要求10所述的方法,其特征在于,所述植物為在受鎘污染的環(huán)境中生長的植物。
14.一種降低水稻地上部鎘積累的方法,所述方法包括敲除水稻細胞中編碼SEQ IDNO:3所示多肽的基因。
15.一種構建細胞質鎘積累降低的轉基因植物的方法,其特征在于,所述方法包括:
(1)提供攜帶表達載體的農桿菌;
(2)將植物細胞或組織或器官與步驟(1)中的農桿菌接觸,使所述表達載體所含的所述多核苷酸序列轉入植物細胞,并且整合到植物細胞的染色體上;
(3)選擇出轉入所述編碼序列的植物細胞或組織;和
(4)將步驟(3)中的植物細胞或組織再生成植株;
其中,所述表達載體含有編碼以下多肽的多核苷酸分子:
(a)SEQ ID NO:3所示的多肽;
(b)SEQ ID NO:3第32-80位所示的多肽;或
(c)由(a)或(b)所述多肽與用于促進(a)或(b)所述多肽的分泌、表達和/或純化的多肽序列組成的多肽。
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