[發明專利]一種評價人乙型肝炎病毒X蛋白結合分子的方法有效
| 申請號： | 201611226738.5 | 申請日： | 2016-12-27 |
| 公開（公告）號： | CN108239657B | 公開（公告）日： | 2022-11-08 |
| 發明（設計）人： | 謝幼華;谷陳建;劉晶;陶帥;潘少坤 | 申請（專利權）人： | 復旦大學 |
| 主分類號： | C12N15/85 | 分類號： | C12N15/85;C07K19/00 |
| 代理公司： | 上海元一成知識產權代理事務所(普通合伙) 31268 | 代理人： | 吳桂琴 |
| 地址： | 200433 *** | 國省代碼： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 評價 乙型肝炎 病毒 蛋白 結合 分子 方法 | ||
1.一種評價人乙型肝炎病毒X蛋白（HBx蛋白）結合分子的方法在用于篩選和鑒定HBx蛋白的結合分子的制品中的用途，所述用途是非治療或診斷的目的；
其中所述的評價人乙型肝炎病毒X蛋白（HBx蛋白）結合分子的方法包括，在細胞內表達分泌型的包含HBx蛋白和熒光素酶NanoLuciferase（Nluc）兩者的重組融合蛋白，通過檢測分泌的融合蛋白的螢光素酶活性，量化分泌的HBx蛋白的水平；
所述的重組融合蛋白為分泌型，包括HBx蛋白和Nluc熒光素酶，兩者之間采用柔性氨基酸序列連接，HBx蛋白位于重組融合蛋白的氨基端或者羧基端；所述的柔性氨基酸序列富含甘氨酸的鏈接序列GGGGSGGGGSGGGGS；
編碼所述的重組融合蛋白的基因的核苷酸序列如SEQ ID NO. 1所示或SEQ ID NO. 2所示，其表達的重組融合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO. 3或SEQ ID NO. 4所示。
2.一種評價人乙型肝炎病毒X蛋白（HBx蛋白）結合分子的方法在用于研制HBx蛋白的靶向藥物中的用途，
其中所述的評價人乙型肝炎病毒X蛋白（HBx蛋白）結合分子的方法包括，在細胞內表達分泌型的包含HBx蛋白和熒光素酶NanoLuciferase（Nluc）兩者的重組融合蛋白，通過檢測分泌的融合蛋白的螢光素酶活性，量化分泌的HBx蛋白的水平；
所述的重組融合蛋白為分泌型，包括HBx蛋白和Nluc熒光素酶，兩者之間采用柔性氨基酸序列連接，HBx蛋白位于重組融合蛋白的氨基端或者羧基端；所述的柔性氨基酸序列富含甘氨酸的鏈接序列GGGGSGGGGSGGGGS；
編碼所述的重組融合蛋白的基因的核苷酸序列如SEQ ID NO. 1所示或SEQ ID NO. 2所示，其表達的重組融合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO. 3所示或SEQ ID NO. 4所示。
3.一種重組融合蛋白的基因表達載體，其特征在于，該表達載體轉染細胞后表達和分泌氨基酸序列如SEQ ID NO. 3或SEQ ID NO. 4所示的重組融合蛋白。
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