[發明專利]活性提高的脂肪酶及其應用

有效

• 申請號: 201611225972.6
• 申請日: 2016-12-27
• 公開（公告）號: CN108239627B
• 公開（公告）日: 2023-06-06
• 發明（設計）人: 王明啟;曹海生;徐正軍;牛其文
• 申請（專利權）人: 豐益（上海）生物技術研發中心有限公司
• 主分類號: C12N9/20
• 分類號: C12N9/20;C12N9/42;C12N15/62;A61K38/46;A61K38/47;A61P3/04;A61P9/10
• 代理公司: 上海專利商標事務所有限公司 31100
• 代理人: 韋東

1.一種融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白的氨基酸序列如SEQ?ID?NO:6、8或10所示。

2.一種多核苷酸分子，其特征在于，所述多核苷酸分子的多核苷酸序列選自：

(1)編碼權利要求1所述融合蛋白的多核苷酸序列；和

(2)(1)所述多核苷酸序列的互補序列。

3.如權利要求2所述的多核苷酸分子，其特征在于，所述多核苷酸分子的多核苷酸序列如SEQ?ID?NO:5、7或9所示。

4.一種核酸構建物，所述核酸構建物含有權利要求2或3所述的多核苷酸分子的多核苷酸序列。

5.如權利要求4所述的核酸構建物，其特征在于，所述核酸構建物是克隆載體或表達載體。

6.一種遺傳工程化的宿主細胞，所述宿主細胞：

(1)表達權利要求1所述的融合蛋白；和/或

(2)含有權利要求2或3所述的多核苷酸序列或權利要求4或5所述的核酸構建物。

7.一種提高脂肪酶比酶活、溫度穩定性和甲醇耐受性的方法，所述方法包括將所述脂肪酶與哈茨木霉(Trichoderma?harzianum)來源的內切葡聚糖酶II的纖維素結合域融合表達的步驟；其中，所述纖維素結合域的氨基酸序列如SEQ?ID?NO:6第1-70位氨基酸殘基所示；所述脂肪酶的氨基酸序列如SEQ?ID?NO:6第71～339位所示或如SEQ?ID?NO:10第1～358位所示。

8.氨基酸序列如SEQ?ID?NO:6第1-70位氨基酸殘基所示的哈茨木霉(Trichodermaharzianum)來源的內切葡聚糖酶II的纖維素結合域在提高脂肪酶比酶活、溫度穩定性和甲醇耐受性中的用途；其中，所述脂肪酶的氨基酸序列如SEQ?ID?NO:6第71～339位所示或如SEQ?ID?NO:10第1～358位所示。

9.權利要求1所述融合蛋白、權利要求2或3所述的多核苷酸分子、權利要求4或5所述的核酸構建物或權利要求6所述的遺傳工程化的宿主細胞在催化酯水解、酯合成、酯交換或立體異構體拆分中的應用。

10.權利要求1所述融合蛋白、權利要求2或3所述的多核苷酸分子、權利要求4或5所述的核酸構建物或權利要求6所述的遺傳工程化的宿主細胞在制備藥物中的應用。