[發明專利]一種堿性果膠酶活性包涵體的制備及其應用有效
| 申請號： | 201611222644.0 | 申請日： | 2016-12-27 |
| 公開（公告）號： | CN106701724B | 公開（公告）日： | 2019-10-08 |
| 發明（設計）人： | 劉松;陳堅;堵國成;趙偉欣;黎青華 | 申請（專利權）人： | 江南大學 |
| 主分類號： | C12N9/88 | 分類號： | C12N9/88;C12N15/60;C07K19/00;C12N1/21;C12N15/70;C12R1/19 |
| 代理公司： | 哈爾濱市陽光惠遠知識產權代理有限公司 23211 | 代理人： | 彭素琴 |
| 地址： | 214122 江*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 堿性果膠酶 包涵體 制備 基因工程菌 突變體 應用 酶活 性質穩定 重復利用 酶工程 保溫 生產 | ||
1.一種堿性果膠酶突變體，其特征在于，氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2.編碼權利要求1所述突變體的基因。
3.一種獲得權利要求1所述堿性果膠酶突變體的方法，其特征在于，將SEQ ID NO.3所示堿性果膠酶氨基酸序列中的自組裝雙親短肽AEAEAKAKAEAEAKAK突變為AELEAKLKAELEAKLK。
4.根據權利要求3所述的方法，其特征在于，所述AELEAKLKAELEAKLK以PT-linker為連接肽與SEQ ID NO.3所示堿性果膠酶N端連接，獲得氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的堿性果膠酶突變體。
5.一種基因工程菌，其特征在于，以大腸桿菌為宿主、pET-22b(+)為載體，表達權利要求1所述堿性果膠酶突變體。
6.權利要求5所述基因工程菌的構建方法，其特征在于，是將權利要求2所述的編碼堿性果膠酶突變體的基因與載體連接，表達至大腸桿菌中。
7.一種生產堿性果膠酶包涵的方法，其特征在于，將權利要求5所述的基因工程菌接種至TB培養基中，30～37℃培養10～36h。
8.根據權利要求7所述的方法，其特征在于，所述方法是以按體積比3～5％的接種量進行接種。
9.根據權利要求7或8所述的方法，其特征在于，當菌體濃度OD600＝0.55～0.65時加入終濃度0.04～0.06mM IPTG進行誘導，28～30℃下誘導培養24～72h。
10.權利要求1所述堿性果膠酶突變體在食品、紡織、造紙領域的應用。
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