[發明專利]一種分泌性能提高的堿性果膠酶突變體有效
| 申請號： | 201611222628.1 | 申請日： | 2016-12-27 |
| 公開（公告）號： | CN106636049B | 公開（公告）日： | 2019-11-08 |
| 發明（設計）人： | 劉松;陳堅;堵國成;趙偉欣;黎青華 | 申請（專利權）人： | 江南大學 |
| 主分類號： | C12N9/88 | 分類號： | C12N9/88;C12N15/60;C07K19/00;C12N1/21;C12N15/70;C12R1/19 |
| 代理公司： | 哈爾濱市陽光惠遠知識產權代理有限公司 23211 | 代理人： | 彭素琴 |
| 地址： | 214122 江*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 堿性果膠酶 突變體 分泌性能 聚半乳糖醛酸 熱力學穩定性 酶工程技術 突變體序列 堿性條件 胞外酶 糖苷鍵 反式 裂解 酶活 熔解 消去 催化 造紙 重復 應用 | ||
【權利要求書】：
1.一種分泌性提高的堿性果膠酶突變體，其特征在于，由SEQ ID NO.2所示基因編碼。
2.如SEQ ID NO.2所示的基因。
3.攜帶權利要求2所述基因的載體或細胞系。
4.一種提高堿性果膠酶分泌能力的方法，其特征在于，將雙親短肽AEAEAKAKAEAEAKAK突變為ADADARARADADARAR。
5.一種產堿性果膠酶的基因工程菌，其特征在于，以大腸桿菌為宿主，pET-22b(+)為載體，表達SEQ ID NO.2所示的堿性果膠酶突變體。
6.一種產堿性果膠酶的方法，其特征在于，所述方法是將權利要求5所述的基因工程菌接種至發酵培養基中，200～220rpm，30～37℃發酵24～72h。
7.根據權利要求6所述的方法，其特征在于，所述接種是按體積以3～5％的接種量接種種子液。
8.根據權利要求6或7所述的方法，其特征在于，所述發酵過程中加入終濃度為0.02～0.06mmol/L IPTG進行誘導。
9.根據權利要求8所述的方法，其特征在于，所述發酵具體是：以按體積比3～5％的接種量接入TB培養基中，37℃，200r·min-1培養至菌體濃度OD600＝0.4，加入終濃度0.04mMIPTG進行誘導，28～30℃下誘導36～48h。
10.權利要求5所述的基因工程菌在食品、環境、紡織、造紙領域制備堿性果膠酶中的應用。
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