[發(fā)明專利]一種利用乳中檸檬酸診斷奶牛產(chǎn)后酮病的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201611221630.7
• 申請日: 2016-12-27
• 公開（公告）號: CN106596912B
• 公開（公告）日: 2019-01-11
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 徐闖;于洪江;楊威;沈泰鈺;高三思;何平;黃寶銀;董志浩;劉潤琪;李蕊蕊;陳媛媛;夏成;張洪友
• 申請（專利權(quán)）人: 黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)
• 主分類號: G01N33/50
• 分類號: G01N33/50;G01N33/06
• 代理公司: 大慶禹奧專利事務(wù)所 23208
• 代理人: 朱士文;楊曉梅

本發(fā)明提供一種利用乳中檸檬酸診斷奶牛產(chǎn)后酮病的方法，所述乳中檸檬酸對奶牛酮病時酮體改變比較敏感,通過檢測乳中檸檬酸含量來診斷奶牛酮病，闡明能量代謝特征性指標(biāo)與乳中檸檬酸之間的關(guān)系，表明乳中檸檬酸與奶牛酮病重要檢測指標(biāo)BHBA、NEFA呈極顯著正相關(guān)，乳中檸檬酸可以作為體外檢測酮病的指標(biāo)來監(jiān)測、診斷奶牛酮病，當(dāng)乳中檸檬酸大于0.205%時可以診斷奶牛患有酮病。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種診斷奶牛產(chǎn)后酮病的方法，特別是一種利用乳中檸檬酸診斷奶牛產(chǎn)后酮病的方法。

背景技術(shù)

隨著全球畜牧業(yè)的大力發(fā)展，奶牛業(yè)已經(jīng)成為支持畜牧業(yè)發(fā)展的一個重要產(chǎn)業(yè)。奶牛酮病是圍產(chǎn)期最常見的一種營養(yǎng)代謝病，尤其高產(chǎn)奶牛多發(fā)，世界各地均有流行，雖然很少能造成死亡，但會引起奶牛產(chǎn)奶量降低，增加治療費(fèi)用，同時酮病奶牛產(chǎn)出的牛奶成分會發(fā)生變化，可能會對人體產(chǎn)生不良影響，給很多高產(chǎn)的大型牛場帶來嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失，所以奶牛酮病越來越受到養(yǎng)殖者們的重視。

檸檬酸，又稱枸櫞酸、2-羥基丙三羧酸，在機(jī)體三羧酸循環(huán)中由乙酰輔酶A和草酰乙酸羧合而成，參與體內(nèi)糖、脂肪和蛋白質(zhì)代謝。已有研究表明在奶牛發(fā)生酮病時，患病奶牛產(chǎn)出的牛奶成分會發(fā)生變化，前人對健康奶牛與患酮病奶牛血漿進(jìn)行核磁共振（1HNuclear Magnetic Resonance，1H NMR），分析發(fā)現(xiàn)酮病奶牛血漿中的檸檬酸會發(fā)生顯著變化，與此同時有人提出在奶牛發(fā)生酮病時，乳中的檸檬酸也會發(fā)生變化。

目前酮病的監(jiān)測主要是根據(jù)血液中β-羥丁酸（BHBA）濃度變化，當(dāng)BHBA>1.2mmol/L時可診斷為奶?；加型?，此種方法雖然準(zhǔn)確率高，但其檢測費(fèi)用大，容易受外界因素影響，需要采集血液進(jìn)行檢測；采集血液會對奶牛造成應(yīng)激性的傷害。因此需要尋找靈敏度高、對奶牛無傷害的一種診斷奶牛產(chǎn)后酮病的方法。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明提供一種利用乳中檸檬酸診斷奶牛產(chǎn)后酮病的方法，所述乳中檸檬酸對奶牛酮病時酮體改變比較敏感,通過檢測乳中檸檬酸含量來診斷奶牛酮病，闡明能量代謝特征性指標(biāo)BHBA與乳中檸檬酸之間的關(guān)系，表明乳中檸檬酸與奶牛酮病呈極顯著正相關(guān)。

本發(fā)明所采用的技術(shù)方案是：一種利用乳中檸檬酸診斷奶牛產(chǎn)后酮病的方法，乳中檸檬酸與奶牛酮病密切相關(guān)，應(yīng)用乳成分分析儀和全自動生化分析儀測定牛乳中檸檬酸、乳脂；血清中BHBA、NEFA的含量, 通過統(tǒng)計學(xué)分析乳中檸檬酸與BHBA、NEFA、乳脂呈極顯著正相關(guān)（P<0.01）,當(dāng)乳中檸檬酸大于0.205% 時可以診斷奶牛患有酮病。

上述方案中實(shí)驗動物數(shù)量、檢測指標(biāo)檸檬酸、BHBA、NEFA、乳脂均具有統(tǒng)計學(xué)意義；對實(shí)驗數(shù)據(jù)進(jìn)行Person相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)，乳中檸檬酸與BHBA、NEFA、乳脂含量均呈極顯著的正相關(guān)（P<0.01），相關(guān)系數(shù)分別為r=0.450,p=0.000；r=0.504，p=0.000；r=0.315，p=0.006.對酮病組與健康組實(shí)驗數(shù)據(jù)進(jìn)行獨(dú)立樣本T檢驗，結(jié)果表明酮病組BHBA、NEFA、檸檬酸均極顯著的高于健康組（P<0.01）。對兩組實(shí)驗數(shù)據(jù)進(jìn)行ROC曲線預(yù)警分析，曲線下面積為0.755,檸檬酸對酮病的預(yù)警值為0.205%,當(dāng)乳中檸檬酸大于0.205% 時，可以診斷奶?；加型?。

本發(fā)明具有的有益效果是：本發(fā)明基于上述背景通過對酮病奶牛與健康奶牛乳汁中檸檬酸含量、血液中BHBA、NEFA含量進(jìn)行Person相關(guān)性分析與ROC曲線分析,明確奶牛發(fā)生酮病時乳汁中檸檬酸變化規(guī)律，確定乳汁中檸檬酸與奶牛發(fā)生酮病時特異性生化指標(biāo)BHBA、NEFA呈極顯著正相關(guān)（P<0.01），乳汁中檸檬酸可以以一種體外檢測酮病的指標(biāo)來更準(zhǔn)確更方便的監(jiān)測、診斷奶牛酮病，當(dāng)乳中檸檬酸大于0.205% 時可以確定奶?；加型?，此方法可以避免采血對奶牛造成的傷害，而又較早的監(jiān)測出酮病，會減少奶牛養(yǎng)殖業(yè)的損失。