[發明專利]用高效液相色譜法測定鹽酸屈他維林注射液中有關物質的方法

有效

• 申請號: 201611221591.0
• 申請日: 2016-12-26
• 公開（公告）號: CN106706789B
• 公開（公告）日: 2019-02-01
• 發明（設計）人: 褚青松;秦雄劍;賈志祥;黃坤
• 申請（專利權）人: 江蘇聯環藥業股份有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/74
• 代理公司: 北京超凡志成知識產權代理事務所(普通合伙) 11371
• 代理人: 王玉桂

1.一種用高效液相色譜法測定鹽酸屈他維林注射液中有關物質的方法，其特征在于，該方法包括如下步驟：

(1)配制供試樣品溶液：

取鹽酸屈他維林注射液用溶劑配制成供試樣品溶液；

(2)配制對照品溶液：

取鹽酸屈他維林、乙基罌粟堿和屈他維林酮用溶劑配制成對照品溶液；

(3)配制系統適用性溶液：

取鹽酸屈他維林、乙基罌粟堿和屈他維林酮用溶劑配制成系統適用性溶液；

(4)進行系統適用性實驗；

(5)進行檢測靈敏度實驗；

用對照品溶液調節高效液相色譜儀的檢測靈敏度，使主成分色譜峰的峰高為滿量程的10-25％；

(6)按照下列高效液相色譜條件進行測定：

流動相：以磷酸鹽緩沖液作為流動相A，以乙腈為流動相B，以甲醇為流動相C；所述磷酸鹽緩沖液為0.1％磷酸水溶液用三乙胺調節至pH＝3.3±0.05；

紫外檢測器：檢測波長為200-400nm；

色譜柱：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；

流速：0.5-2.0mL/min；

柱溫：20-60℃；

(7)按外標法，計算有關物質的含量；

以流動相A、流動相B和流動相C進行梯度洗脫；所述的梯度為：

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述的紫外檢測器的檢測波長為200-300nm。

3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述的紫外檢測器的檢測波長為244nm。

4.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述流速為1.0mL/min；所述柱溫為30-50℃。

5.根據權利要求4所述的方法，其特征在于，所述柱溫為40℃。

6.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述供試樣品溶液的配制具體包括配制含鹽酸屈他維林0.8mg/mL的溶液，所述溶液的溶劑為流動相A、甲醇和乙腈形成的混合溶劑，所述混合溶劑為將甲醇和乙腈按體積比2:1混合后的混合液再與流動相A按體積比1:9混合。

7.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述對照品溶液的配制具體包括配制含鹽酸屈他維林、乙基罌粟堿和屈他維林酮的溶液，所述溶液中鹽酸屈他維林的濃度為4.0μg/mL；乙基罌粟堿的濃度為1.6μg/mL；屈他維林酮的濃度為4.0μg/mL；將鹽酸屈他維林、乙基罌粟堿和屈他維林酮先用甲醇與乙腈體積比為2:1的混合液溶解，然后加入流動相A、甲醇和乙腈形成的混合溶劑，所述混合溶劑為將甲醇和乙腈按體積比2:1混合后的混合液再與流動相A按體積比1:9混合。

8.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述系統適用性溶液的配制具體包括配制含鹽酸屈他維林、乙基罌粟堿和屈他維林酮的溶液，所述溶液中鹽酸屈他維林的濃度為0.8mg/mL；乙基罌粟堿的濃度為1.6μg/mL；屈他維林酮的濃度為4.0μg/mL；將鹽酸屈他維林、乙基罌粟堿和屈他維林酮先用甲醇與乙腈體積比為2:1的混合液溶解，然后加入流動相A、甲醇和乙腈形成的混合溶劑，所述混合溶劑為將甲醇和乙腈按體積比2:1混合后的混合液再與流動相A按體積比1:9混合。

9.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述系統適用性試驗是指取系統適用性溶液20μL注入液相色譜儀，鹽酸屈他維林與乙基罌粟堿的分離度大于3.0，各雜質峰之間分離度符合要求，理論塔板數按鹽酸屈他維林計算，不低于3000。