[發明專利]煙草富鉀篩選和鑒定方法

有效

• 申請號: 201611217875.2
• 申請日: 2016-12-26
• 公開（公告）號: CN106613924B
• 公開（公告）日: 2019-02-15
• 發明（設計）人: 湯朝起;沈晗;張駿
• 申請（專利權）人: 上海煙草集團有限責任公司
• 主分類號: A01H1/04
• 分類號: A01H1/04;A01G7/00
• 代理公司: 上海光華專利事務所(普通合伙) 31219
• 代理人: 高燕;許亦琳

本發明提供煙草富鉀篩選和鑒定方法，包括以下步驟：1）將煙草種子播種至低鉀培養基上進行育苗，依據煙苗對低鉀反應的程度，將煙苗劃分等級，篩選變黃程度高且有活性的煙株移植至完全營養液上生長；2）待煙苗生長至6?8片時移栽至大田，于成熟期對所選植株上相同葉位的煙葉殺青、烘干、磨碎、過篩，測定鉀含量，標記鉀含量高的所述植株；3）收獲鉀含量高的植株種子，通過重復步驟1）、步驟2）種植篩選，直至基因型純合，選育出富鉀煙草品種。本發明依據富鉀變異體不耐低鉀原理，利用低鉀培養基篩選富鉀煙草變異材料，后期結合大田驗證，結果準確、穩定。

技術領域

本發明涉及煙草遺傳性與品種選育領域，特別是涉及煙草富鉀篩選和鑒定方法。

背景技術

鉀是煙草最重要的品質元素之一，其與煙葉成熟度、燃燒性、香吃味和卷煙制品安全性密切相關。與國外煙葉鉀含量(＞3％)相比，中國大部分地區尤其是北方地區，煙葉平均鉀含量很少超過1.5％，煙葉鉀含量偏低是制約中國煙葉質量提升的關鍵指標之一。生產優質煙葉必須施用形成最適產量需鉀量的2～3倍的鉀肥，才能明顯提高煙葉鉀含量，但我國鉀肥資源匱乏，通過改善農藝操作來提高鉀含量又有一定的限度，因此篩選或選育烤煙鉀高效基因型品種，充分利用土壤以及施用的鉀素，對提高煙葉鉀含量、降低生產成本、節約資源有重要意義。

目前，國際煙草育種領域內無培育富鉀煙草品種的方法，也沒有選育出富鉀煙草品種。為了提高煙葉鉀含量一般采用以下兩種方法：

1、常規雜交篩選法：首先對雜交所用親本進行雜交組合的雜種優勢、配合力和遺傳力分析，然后選用具有不同鉀吸收效率的煙草親本進行雜交，一株一株的測定雜交后代的煙葉鉀含量，從中篩選出煙葉鉀含量較高的變異植株。但是常規雜交篩選法必須在煙葉收獲后進行大量檢測才知結果，因此，盲目性大，工作量大。

2、轉基因法：利用基因工程技術把一些鉀高效基因轉入到其他植株內并誘導其表達，可以快速并高效的獲得鉀高效植物，但現在國際上限制煙草轉基因用于生產，故該技術不能利用。并且，在轉基因法中，鉀積累的遺傳特性受多基因控制，具有數量遺傳特征，且受環境條件影響較大。如果單純地測定與鉀吸收和轉運相關的基因，可能得不到富鉀煙草變異類型，即一些測試結果與大田試驗結果并不一致，這就是目前富鉀煙草培育不出來的主要原因。

發明內容

鑒于以上所述現有技術的缺點，本發明的目的在于提供一種煙草富鉀篩選和鑒定方法，該方法省時省力、操作性強，大大提高富鉀煙草品種的篩選效率。

為實現上述目的及其他相關目的，本發明提供一種煙草富鉀篩選和鑒定方法，包括以下步驟：1)將煙草種子播種至低鉀培養基上進行育苗，依據煙苗對低鉀反應的程度，將煙苗劃分等級，篩選出變黃程度高且有活性的植株移植至完全營養液上生長；2)將所選植株移栽至大田，追施鉀肥，于成熟期對所選植株上相同葉位的煙葉殺青、烘干、磨碎、過篩，測定鉀含量，標記鉀含量高的所述植株；3)收獲鉀含量高的所述植株的種子，通過重復所述步驟1)、所述步驟2)種植篩選，直至基因型純合，選育出富鉀煙草品種。

優選地，所述煙草富鉀篩選和鑒定方法還包括對所述煙草種子的選取及消毒的步驟，具體過程為：選取飽滿一致的煙草種子；將所述煙草種子置于45-55℃溫水浸泡2-3h；然后采用質量分數為70-80％的CH₃CH₂OH水溶液處理30-40s，再采用無菌水沖洗4-7次，然后使用質量分數為9-11％次氯酸水溶液處理25-35min，再采用無菌水沖洗4-7次。

優選地，在所述步驟1)中，所述低鉀培養基的鉀濃度為0.10-0.17mmoL/L。一般來講，煙草種子育苗選用的培養基的完全營養液的鉀濃度為5.5-6.5mmoL/L，而本發明中采用低鉀培養基選用的低鉀營養液的鉀濃度控制在0.10-0.17mmoL/L，大大低于完全營養液的鉀濃度。

優選地，在所述步驟1)中，所述完全營養液的鉀濃度為5.5-6.5mmoL/L。