[發明專利]一種血栓心脈寧片中五種人參皂苷類成分的含量測定方法

有效

• 申請號: 201611215163.7
• 申請日: 2016-12-26
• 公開（公告）號: CN107064329B
• 公開（公告）日: 2018-09-25
• 發明（設計）人: 劉永利;王曉蕾;趙振霞;李冬梅;王常順
• 申請（專利權）人: 河北省藥品檢驗研究院
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種血栓心脈寧片中五種人參皂苷類成分的含量測定方法，五種人參皂苷類成分為20(S)-人參皂苷F1及人參皂苷Rg₁、人參皂苷Re、人參皂苷Rb₁、人參皂苷Rd；該方法采用超高效液相色譜-質譜聯用法，其特征在于該含量測定方法如下：

色譜條件與系統適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；流動相A為乙腈，流動相B為水，進行梯度洗脫，洗脫梯度為：0-2分鐘，流動相A由20％線性變化到50％，2.01分鐘，流動相A變為80％，保持3分鐘；流速：0.5ml/min；質譜條件，離子源：電噴霧離子源，ESI源；監測模式：負離子多反應監測模式；脫溶劑氣溫度：500℃；毛細管電壓：3.00kV；錐孔電壓：20V；監測離子對及相關電壓參數設定如下表：

標準儲備溶液：分別稱取人參皂苷Re、人參皂苷Rg₁、20(S)-人參皂苷F₁、人參皂苷Rb₁、人參皂苷Rd標準品各10mg，置100ml量瓶中，加甲醇使溶解并定容至刻度，搖勻，即得質量濃度為0.1g/L的標準儲備溶液；

系列標準溶液：按照人參皂苷Re、人參皂苷Rg₁、人參皂苷Rd、人參皂苷Rb₁系列標準溶液濃度為0.01μg/ml-1.00μg/ml，20(S)-人參皂苷F₁系列標準溶液濃度為0.05μg/ml-1.00μg/ml，精密吸取標準儲備溶液，置10mL量瓶中，以20％乙腈水溶液稀釋并定容至刻度，得不同濃度的系列標準溶液；

供試品溶液的制備：取血栓心脈寧片，研細，取0.5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入80％甲醇25mL，密塞，稱定重量，置水浴中加熱回流60-90分鐘，取出，放冷，再稱定重量，用80％甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液；再精密量取續濾液1ml，置100ml量瓶中，以20％乙腈水溶液稀釋并定容至刻度，0.2μm微孔濾膜過濾，濾液作為待測液，備用；

測定法：分別精密吸取對照品系列溶液與供試品溶液各2-5μl，注入液相色譜儀，測定，以標準曲線法計算含量，即得。

2.根據權利要求1所述的含量測定方法，其特征在于所述供試液制備中加熱回流時間為75min。

3.根據權利要求1-2任一項所述的含量測定方法，其特征在于該含量測定方法如下：

色譜條件與系統適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；流動相A為乙腈，流動相B為水，進行梯度洗脫，洗脫梯度為：0-2分鐘，流動相A由20％線性變化到50％，2.01分鐘，流動相A變為80％，保持3分鐘；流速：0.5ml/min；質譜條件，離子源：電噴霧離子源ESI源；監測模式：負離子多反應監測模式；脫溶劑氣溫度：500℃；毛細管電壓：3.00kV；錐孔電壓：20V；監測離子對及相關參數設定如下表：

標準儲備溶液：分別稱取人參皂苷Re、人參皂苷Rg₁、20(S)-人參皂苷F₁、人參皂苷Rb₁、人參皂苷Rd標準品各10.0mg標準品各10mg，置100ml量瓶中，加甲醇使溶解并定容至刻度，搖勻，即得質量濃度為0.1g/L的標準儲備溶液；

系列標準溶液：按照人參皂苷Re、人參皂苷Rg₁、人參皂苷Rd、人參皂苷Rb₁系列標準溶液濃度為0.01μg/ml-1.00μg/ml，20(S)-人參皂苷F₁系列標準溶液濃度為0.05μg/ml-1.00μg/ml，精密吸取標準儲備溶液，置10mL量瓶中，以20％乙腈水溶液稀釋并定容至刻度，得不同濃度的系列標準溶液；

供試品溶液的制備：取血栓心脈寧片，研細，取0.5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入80％甲醇25mL，密塞，稱定重量，置水浴中加熱回流75分鐘，取出，放冷，再稱定重量，用80％甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液；再精密量取續濾液1ml，置100ml量瓶中，以20％乙腈水溶液稀釋并定容至刻度，0.2μm微孔濾膜過濾，濾液作為待測液，備用；

測定法：分別精密吸取對照品系列溶液與供試品溶液各5μl，注入液相色譜儀，測定，以標準曲線法計算含量，即得。