[發(fā)明專利]一種含抗菌肽的生物活性表面的牙種植體制備方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201611207445.2
• 申請(qǐng)日: 2016-12-23
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN106729989A
• 公開(kāi)（公告）日: 2017-05-31
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 楊舸;張久文;蔡俊江;彭鵬;李閃
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 大連三生科技發(fā)展有限公司
• 主分類號(hào): A61L27/30
• 分類號(hào): A61L27/30;A61L27/34;A61L27/58;A61L27/54;A61L27/50
• 代理公司: 大連東方專利代理有限責(zé)任公司21212
• 代理人: 趙淑梅

1.一種含抗菌肽的生物活性表面的牙種植體制備方法，其特征在于：所述抗菌肽層為覆蓋于表面為二氧化鈦納米管陣列層的牙種植體表面，且由正電荷殼聚糖層和負(fù)電荷AMP復(fù)合物層交替組裝，最外層負(fù)載硫酸軟骨素層-抗菌肽層；

所述抗菌肽層的制備方法包括以下操作步驟：

(1)將表面為二氧化鈦納米管陣列層的牙種植體清洗備用；

(2)制備0.5～5mg/ml的殼聚糖溶液：濃度為1mg/mlAMP復(fù)合物溶液；

(3)將步驟(1)所述的牙種植體浸沒(méi)于步驟(2)所得殼聚糖溶液中10～20min，以使牙種植體表面帶上正電荷；再用去離子水充分清洗；

(4)將步驟(3)所述的牙種植體浸沒(méi)于濃度為1mg/mlAMP復(fù)合物溶液中5～10min，以使牙種植體表面帶上負(fù)電荷；再用去離子水充分清洗；

根據(jù)需要組裝的層數(shù)，重復(fù)步驟(3)、(4)和(3)即可得到帶有不同層數(shù)涂層的牙種植體；

(5)將步驟(4)所述的牙種植體在濃度為2mg/mL的硫酸軟骨素硫酸鈉鹽溶液中浸泡5～15min，溶液體系控制pH值為6，再用去離子水充分清洗后自然干燥；再將涂覆有硫酸軟骨素的牙種植體浸泡于pH值為7，濃度為0.5mg/mL的抗菌肽溶液中5～15min，再用去離子水充分清洗后自然干燥，獲得涂覆有硫酸軟骨素層-抗菌肽層復(fù)合層的材料。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的含抗菌肽的生物活性表面的牙種植體制備方法，其特征在于：所述的清洗是指去離子水，乙醇和丙酮超聲清洗，用氮?dú)獯蹈珊螅庞谡婵崭稍锵渲校?0℃的條件下干燥24小時(shí)。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的含抗菌肽的生物活性表面的牙種植體制備方法，其特征在于：所述的殼聚糖的脫乙酰度為50～98％，Mw為100～1500kDa。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的含抗菌肽的生物活性表面的牙種植體制備方法，其特征在于：所述的殼聚糖溶液為將殼聚糖溶解在0.3～3％的乙酸溶液中，配成0.5～5mg/ml的殼聚糖溶液，將所得溶液與液體石蠟混合，體積比為0.1～0.4，并加入體積濃度為0.5～1％的司盤(pán)80，同時(shí)加入分散劑硬脂酸鎂，司盤(pán)80與硬脂酸鎂的質(zhì)量比為2～4∶1，攪拌所得油包水乳液，向其中加入5～10mg/ml的交聯(lián)劑香草醛1ml，40℃～60℃攪拌狀態(tài)下反應(yīng)4～6小時(shí)后；靜置取上清液；再將所得的殼聚糖微粒以水懸浮，添加少量的冰醋酸溶液，磁力攪拌器攪拌條件下，再加入NaCl，使其終濃度達(dá)到0.15M；該溶液帶正電荷。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的含抗菌肽的生物活性表面的牙種植體制備方法，其特征在于：所述靜置取上清液是指，靜置12小時(shí)以上分離油水相，取下層水溶液，調(diào)節(jié)pH值為8～9，離心除去沉淀物，取上清液得到殼聚糖微粒懸浮液。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的含抗菌肽的生物活性表面的牙種植體制備方法，其特征在于：所述濃度為lmg/ml的AMP復(fù)合物溶液的配置方法為：秤取50mg AMP復(fù)合物粉末加至50ml的滅菌后去離子水中，攪拌充分至完全溶解，加冰醋酸調(diào)pH為5.0，此溶液帶有正電荷。