[發明專利]大櫻桃砧木大青葉的繁殖方法

在審

• 申請號: 201611204332.7
• 申請日: 2016-12-23
• 公開（公告）號: CN108235945A
• 公開（公告）日: 2018-07-03
• 發明（設計）人: 丁福冬
• 申請（專利權）人: 句容市綠潤苗木有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 江蘇圣典律師事務所 32237
• 代理人: 吳庭祥

1.一種大櫻桃砧木大青葉的繁殖方法，其特征在于所述繁殖方法包括以下步驟：

第一步芽莖處理：采大青葉枝條，去掉所有葉片后用洗潔凈洗凈表面，自來水沖洗25分鐘后置于工作臺上，用70％～75％酒精滅菌1～2分鐘，再用0.1％升汞浸泡5～10分鐘，無菌水沖洗10次后切帶芽莖段備用；

第二步培養基選擇：選取MS基本培養基，蔗糖濃度取1～5％，瓊脂0.5～0.8％，PH值為6.0。培養室溫度25℃，光強1500～2000Lx，每天光照10～15小時；

第三步接種：將外植體接種在MS+6—BA 0.3～0.7mg/L+NAA 0.1～0.5mg/L的培養基上進行初始培養，3～5天后將初始培養誘導的芽苗轉入MS+6—BA 0.3～0.6mg/L+NAA0.15～0.25mg/L的培養基上增殖，增殖培養2～3周后，取1.5～2.0cm新梢轉移到1/2MS+NAA 0.4～0.7mg/L+15～25g蔗糖的生根培養基上，每天紅光照射8～12小時，培養20天左右；

第四步煉苗：取出生根的試管苗，洗凈粘附的培養基，移載到混合基質中，放在溫室中的小拱棚煉苗，拱棚溫度控制在21℃～23℃，相對濕度在移栽培養初期為90％以及以上；

第五步移栽：溫室培養30～45天后，露天培養4～9天，移栽于大田苗圃。

2.根據權利要求1所述的大櫻桃砧木大青葉的繁殖方法，其特征在于：芽莖處理時用70％酒精滅菌90秒，再用0.1％升汞浸泡8分鐘。

3.根據權利要求1所述的大櫻桃砧木大青葉的繁殖方法，其特征在于：蔗糖濃度取2％，瓊脂0.6％，PH值為6.0。培養室溫度25℃，光強1800Lx，每天光照12小時。

4.根據權利要求1所述的大櫻桃砧木大青葉的繁殖方法，其特征在于：接種時將外植體接種在MS+6—BA 0.5mg/L+NAA 0.2mg/L的培養基上進行初始培養，4天后將初始培養誘導的芽苗轉入MS+6—BA 0.5mg/L+NAA 0.2mg/L的培養基上增殖，增殖培養15天后，取1.8cm新梢轉移到1/2MS+NAA 0.5mg/L+18g蔗糖的生根培養基上。

5.根據權利要求1所述的大櫻桃砧木大青葉的繁殖方法，其特征在于：步驟三中紅光波長為610～720nm。

6.根據權利要求5所述的大櫻桃砧木大青葉的繁殖方法，其特征在于：步驟三中紅光波長為660nm。

7.根據權利要求1所述的大櫻桃砧木大青葉的繁殖方法，其特征在于：步驟三中所用紅光燈為LED燈。

8.根據權利要求1所述的大櫻桃砧木大青葉的繁殖方法，其特征在于：步驟三中所述紅光照射時間為10小時。

9.根據權利要求1所述的大櫻桃砧木大青葉的繁殖方法，其特征在于：煉苗時拱棚溫度控制在22℃，相對濕度在移栽培養初期為91％。

10.根據權利要求1所述的大櫻桃砧木大青葉的繁殖方法，其特征在于：移栽時溫室培養40天后，露天培養8天。