[發明專利]玉米赤霉烯酮檢測卡以及使用該檢測卡的玉米赤霉烯酮檢測方法

在審

• 申請號: 201611197708.6
• 申請日: 2016-12-22
• 公開（公告）號: CN108226487A
• 公開（公告）日: 2018-06-29
• 發明（設計）人: 歐靜堃;何景;羅榮;胡夢龍;蔡軍;李慧;朱鏡羲
• 申請（專利權）人: 中糧集團有限公司;中糧營養健康研究院有限公司
• 主分類號: G01N33/558
• 分類號: G01N33/558;G01N33/559
• 代理公司: 北京信慧永光知識產權代理有限責任公司 11290
• 代理人: 洪俊梅;張淑珍

1.一種玉米赤霉烯酮檢測卡，所述檢測卡包含樣品墊、金標墊、層析膜、吸水墊和底板，其特征在于，所述樣品墊、金標墊、層析膜和吸水墊在所述底板上依次排列；所述金標墊上涂覆固定有抗玉米赤霉烯酮抗體的膠體金，并且所述層析膜上設置固定有玉米赤霉烯酮半抗原的檢測線和固定有二抗的質控線。

2.如權利要求1所述的玉米赤霉烯酮檢測卡，其中，所述樣品墊由以下步驟制備：

配制浸泡液；

用配制的浸泡液浸泡所述樣品墊；以及

將浸泡后的所述樣品墊烘干，

其中，所述浸泡液包含0.5-3wt％的保護蛋白、2-10wt％的二糖；并使用緩沖體系將所述浸泡液的pH調節為7.0-9.0。

3.如權利要求2所述的玉米赤霉烯酮檢測卡，其中，所述保護蛋白為牛血清白蛋白和/或酪蛋白；所述二糖為蔗糖和/或海藻糖；所述緩沖體系為PBST緩沖體系；

其中，所述浸泡步驟包括將所述樣品墊平放于所述浸泡液中，使之完全浸入，浸泡30min-2h；

其中，所述烘干步驟包括取出所述樣品墊，在37℃干燥環境中放置2h-10h，隨后放置于濕度<10％的環境中保存備用。

4.如權利要求1所述的玉米赤霉烯酮檢測卡，其中，所述金標墊由以下步驟制備：

配制浸泡液；

用配制的浸泡液浸泡所述金標墊；

將浸泡后的所述金標墊烘干；

向所述金標墊噴涂固定有抗玉米赤霉烯酮抗體的膠體金；

使噴涂后的所述金標墊干燥；以及

組裝，

其中，所述浸泡液包含0.5-1wt％的BSA、0.01-0.1wt％的吐溫80；并且，使用緩沖體系將所述浸泡液的pH調節為7.0-9.0；以及

其中，在進行所述噴涂時，所述金標墊的含水量為60-80wt％；并且，在進行所述干燥后，所述金標墊的含水量為<10wt％。

5.如權利要求4所述的玉米赤霉烯酮檢測卡，其中，所述金標墊靠近所述層析膜的一端有0.8-1.2mm的長度壓在所述層析膜上方、靠近所述樣品墊的一端有0.5-2.0mm的長度被壓在所述樣品墊下方，并且所述層析膜和所述樣品墊間的所述金標墊長度為0.5-1.5mm。

6.如權利要求1所述的玉米赤霉烯酮檢測卡，其中，所述層析膜由以下步驟制備：

將玉米赤霉烯酮半抗原和二抗固定在所述層析膜上，分別形成檢測線和質控線；

使固定后的所述層析膜干燥；以及

組裝，

其中，在進行所述固定時，所述層析膜的含水量為50％-80wt％；并且，在進行所述干燥后，所述層析膜的含水量為<10wt％。

7.如權利要求6所述的玉米赤霉烯酮檢測卡，其中，所述層析膜靠近所述金標墊的一端有0.8-1.2mm的長度被壓在所述金標墊下方，靠近所述吸水墊的一端有0.5-1.5mm的長度被壓在所述吸水墊下方。

8.如權利要求4所述的玉米赤霉烯酮檢測卡，其中，所述緩沖體系為PB緩沖液。

9.一種對樣品中的玉米赤霉烯酮進行檢測的方法，所述方法包括如下步驟：

樣品前處理；

使用權利要求1-8中任意一項所述的玉米赤霉烯酮檢測卡對樣品進行檢測；以及

結果分析，

優選地，所述樣品為飼料。

10.如權利要求9所述的方法，其中，

所述樣品前處理包括：按照樣品:70-100％(v/v)甲醇為1:2-1:5的重量體積比稱取樣品并量取甲醇，混合，上下顛倒充分混勻3-10min；隨后在室溫下離心1-10min，離心速度為5000-10000rpm；取上清加至新的離心管中作為檢測樣品；

所述對樣品進行檢測包括：向所述樣品墊上離所述樣品墊兩端的距離為3-8mm的部位緩慢逐滴滴加樣品液，直到所述樣品液流至所述層析膜時停止滴加所述樣品液；和/或

所述結果分析包括：(1)當所述樣品液已上升至接觸所述吸水墊時，若所述檢測線和所述質控線均清晰可見，則判定檢測結果為陰性，否則繼續靜置；(2)靜置5-15min后，若所述質控線清晰可見、且所述檢測線未出現，則判定檢測結果為陽性；(3)靜置5-15min后，若所述檢測線與所述質控線均未出現、或所述檢測線清晰可見而所述質控線未出現，則判定檢測結果無效，取另一檢測卡重新檢測。