[發(fā)明專利]一種酶活及熱穩(wěn)定性改善的凝乳酶突變體有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201611195945.9 | 申請日： | 2016-12-22 |
| 公開（公告）號： | CN106754840B | 公開（公告）日： | 2019-06-21 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 丁重陽;張琦;艾連中;王瓊;杭鋒;苑暢;石貴陽 | 申請（專利權(quán)）人： | 江南大學(xué) |
| 主分類號： | C12N9/64 | 分類號： | C12N9/64;C12N1/19;C12N15/81;C12R1/84 |
| 代理公司： | 哈爾濱市陽光惠遠(yuǎn)知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 23211 | 代理人： | 彭素琴 |
| 地址： | 214122 江*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 凝乳酶 突變體 熱穩(wěn)定性 粗酶液 酶活 替換 耐熱性 酶工程技術(shù) 畢赤酵母 出發(fā)菌株 蛋白酶活 谷氨酰胺 雙突變體 異源表達 蛋氨酸 亮氨酸 蘇氨酸 氨基酸 構(gòu)建 位點 突變 檢測 | ||
1.一種凝乳酶突變體，其特征在于，氨基酸序列如SEQ ID NO.1～3任一所示。
2.編碼權(quán)利要求1所述凝乳酶突變體的基因。
3.表達權(quán)利要求1所述凝乳酶突變體的載體或細(xì)胞系。
4.一種產(chǎn)凝乳酶的基因工程菌，其特征在于，以畢赤酵母為宿主，表達SEQ ID NO.1～3任一所示的凝乳酶突變體。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的基因工程菌，其特征在于，以畢赤酵母GS115為宿主。
6.構(gòu)建權(quán)利要求4所述基因工程菌的方法，其特征在于，所述方法是將載體與編碼權(quán)利要求1所述凝乳酶突變體的基因連接，轉(zhuǎn)化至畢赤酵母中。
7.一種提高凝乳酶酶活的方法，其特征在于，是將SEQ ID NO.4所示的凝乳酶第75位亮氨酸突變?yōu)楣劝滨０罚驅(qū)⒌?22位的蛋氨酸替換為蘇氨酸。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其特征在于，所述方法是將SEQ ID NO.4所示的凝乳酶第75位亮氨酸突變?yōu)楣劝滨０罚⒌?22位的蛋氨酸替換為蘇氨酸。
9.一種產(chǎn)凝乳酶的方法，其特征在于，將權(quán)利要求4所述的基因工程菌接種至發(fā)酵培養(yǎng)基中，25～30℃培養(yǎng)24～96h。
10.權(quán)利要求1所述凝乳酶突變體在食品、生物、醫(yī)藥領(lǐng)域的應(yīng)用。
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