[發明專利]miRNA?146a及其抑制劑在提高CIK細胞殺傷力方面的應用

在審

• 申請號: 201611194999.3
• 申請日: 2016-12-22
• 公開（公告）號: CN106581065A
• 公開（公告）日: 2017-04-26
• 發明（設計）人: 不公告發明人
• 申請（專利權）人: 南京佰泰克生物技術有限公司
• 主分類號: A61K35/17
• 分類號: A61K35/17;A61K38/12;A61P35/02
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明屬于免疫領域，涉及CIK細胞的培養，具體涉及miRNA-146a及其抑制劑在提高CIK細胞殺傷力方面的應用。

背景技術

隨著腫瘤臨床治療的發展，腫瘤免疫治療方法受到廣泛關注。細胞免疫治療為腫瘤免疫治療的一種，目的是通過改善患者的免疫系統，達到間接治療腫瘤的目的。常用于細胞免疫治療的細胞包括細胞因子誘導的殺傷(CIK)細胞、樹突狀細胞(DC)、自然殺傷(NK)細胞等。其中，CIK細胞是一種經體外誘導培養形成的具有腫瘤細胞殺傷活性的NK樣T細胞，其克服了淋巴因子激活的殺傷細胞(LAK)、腫瘤浸潤細胞(TIL)等細胞增殖能力差、對腫瘤細胞毒性低的缺點，能滿足臨床治療的要求[Cytokine-induced NK-like T cells:from bench to bedside.JBiomed Biotechnol,2010]。

CIK細胞培養簡單，將單個核細胞在體外培養，有序地添加IFN-γ、抗CD3單克隆抗體、IL-1α、IL-2進行誘導，2～3周以后即可收獲大量具有強細胞毒性的效應細胞。收獲的CIK細胞是異質細胞群，大約95％以上表達CD3+，還含有少量NK細胞。CIK細胞主要的效應群體是一群終末分化的T細胞，細胞表面表達CD3+CD56+。在單個核細胞中，原有CD3+CD56+表達很低；經過體外誘導以后，表達CD3+CD56+的細胞迅速擴增，這些細胞來源于單個核細胞中的CD3+CD56-細胞，是由CD3+CD56-細胞中的CD4-CD8+細胞誘導而來[Characterization of the recognition and functional heterogeneity exhibited by cytokineinduced killer cell subsets against acute myeloid leukaemia target cell.Immunology,2009]。

CIK細胞的體外增殖能力遠優于LAK細胞，在短期培養后即可達到臨床所需要的抗腫瘤效應細胞的數量。CIK細胞有廣譜的、較強的殺傷腫瘤細胞的作用，對腫瘤細胞的毒性是非MHC限制的，對一些具有耐藥性的腫瘤細胞系的毒性也不受影響[CIK cells from patients with HCC possess strong cytotoxicity to multidrug-resistant cell line Bel-7402/R.World J Gastroenterol,2005]。CIK細胞對同種自體或者同種異體腫瘤均具有相似的細胞毒性，并且對一般的腫瘤干細胞樣細胞也具有細胞毒性[Cytokineinduced killer cells eradicate bone and soft-tissue sarcomas.Cancer Res,2014]。為了提高CIK的毒性和治療效果，許多研究致力于CIK細胞。

發明內容

本發明首先提供miRNA-146a作為藥物靶標在提高CIK細胞對腫瘤細胞的殺傷力中的應用；其次提供miRNA-146a抑制劑或含有該抑制劑的試劑或試劑盒在提高CIK細胞對腫瘤細胞殺傷力中的應用，并提供Cyclo(Gly-Thr-Phe-Leu-Tyr-Ala)作為有效miRNA-146a抑制劑。

本發明通過如下技術方案得以實現：

miRNA-146a作為藥物靶標在提高CIK細胞對腫瘤細胞的殺傷力中的應用。

進一步地，所述腫瘤細胞為白血病細胞。

miRNA-146a抑制劑在提高CIK細胞對腫瘤細胞的殺傷力中的應用。

進一步地，所述腫瘤細胞為白血病細胞。

進一步地，miRNA-146a抑制劑為環狀六肽，結構為Cyclo(-Gly-Thr-Phe-Leu-Tyr-Ala-)。

含miRNA-146a抑制劑的試劑或試劑盒在提高CIK細胞對腫瘤細胞殺傷力中的應用。

進一步地，所述腫瘤細胞為白血病細胞。

進一步地，miRNA-146a抑制劑為環狀六肽，結構為Cyclo(-Gly-Thr-Phe-Leu-Tyr-Ala-)。

本發明優點：