[發明專利]一種利用茶樹花的酶合成1?苯基乙醇的方法在審
| 申請號： | 201611194766.3 | 申請日： | 2016-12-22 |
| 公開（公告）號： | CN106834245A | 公開（公告）日： | 2017-06-13 |
| 發明（設計）人： | 周瀛;東方;楊子銀;曾蘭亭 | 申請（專利權）人： | 中國科學院華南植物園 |
| 主分類號： | C12N9/02 | 分類號： | C12N9/02;C12P7/22 |
| 代理公司： | 廣州市深研專利事務所44229 | 代理人： | 姜若天 |
| 地址： | 510000 廣東省廣*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 利用 茶樹 合成 苯基 乙醇 方法 | ||
【權利要求書】：
1.一種利用茶樹花的酶合成1-苯基乙醇的方法，其特征在于，包括以下步驟：
（1）1-苯基乙醇合成酶粗酶的制備：
將聚乙烯吡咯烷酮和3-[3-(膽酰胺丙基)二甲氨基]丙磺酸內鹽加入茶樹花中；
用pH值為7的磷酸鉀緩沖液在冰上充分勻漿，緩沖液中同時含有1%的甘油，1 mM EDTA；勻漿產物在4℃下離心15-20分鐘；
離心之后的上清液通過PD-10脫鹽柱將目的蛋白用含有0.1%甘油、0.1 mM EDTA的磷酸鉀緩沖液洗脫，緩沖液的濃度為10 mM, pH值為7，得到1-苯基乙醇合成酶粗酶；
（2）1-苯基乙醇的合成：
底物苯乙酮在1-苯基乙醇合成酶粗酶的催化下生成1-苯基乙醇；反應所使用的緩沖液為100 mM磷酸鉀緩沖液；反應液中包含1.25mM的苯乙酮，3.75 mM的輔酶NADPH和0.1 μg/μl的酶。
2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：步驟（2）的反應溫度為55℃，合成pH為4.5-5.3，反應時間為100分鐘。
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