[發明專利]一種鐵線蓮屬植物直接不定芽離體發生的方法

在審

• 申請號: 201611192858.8
• 申請日: 2016-12-21
• 公開（公告）號: CN108207621A
• 公開（公告）日: 2018-06-29
• 發明（設計）人: 朱木蘭;奉樹成;劉航
• 申請（專利權）人: 中國科學院上海生命科學研究院
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 上海一平知識產權代理有限公司 31266
• 代理人: 王正君;馬思敏

本發明提供了一種鐵線蓮屬植物直接不定芽離體發生的方法，具體地，本發明提供了一種鐵線蓮屬植物的繁殖方法，包括步驟：(a)將所述鐵線蓮屬植物的莖段無菌培養獲得帶腋芽的莖段；(b)切除所述步驟(a)獲得的莖段的腋芽后進行誘導培養，長出不定芽；(c)對所述步驟(b)獲得的不定芽進行培養，生根獲得植株。本發明首次以鐵線蓮屬植物無菌萌發的莖段為起始外植體，進行離體繁殖，不經過愈傷組織形成階段的直接誘導不定芽發生,并經過再生芽苗的伸長、生根及移栽成苗后，可獲得大量再生植株表型一致性高、遺傳穩定性好的鐵線蓮屬植物。

技術領域

本發明涉及鐵線蓮屬植物栽培領域，具體涉及一種鐵線蓮屬植物直接不定芽離體發生的方法。

背景技術

鐵線蓮屬(Clematis)為多年生木質或草質藤本，或為直立灌木或草本，全世界約300種，分布于熱帶及亞熱帶地區，我國約有108種，全國各地都有分布。鐵線蓮屬植物兼具藥用與觀賞功能，植株含有三萜皂苷、生物堿、香豆素、木脂素和黃酮類化學成分，具有抗菌、消炎、抗腫瘤和鎮痛等藥理作用。其花型多樣，色彩繽紛，素有“藤本皇后”的美譽，現有的栽培品種600余種，在城市園林中已有應用，深受家庭園藝愛好者的推崇。鐵線蓮可點綴于圍墻、柵欄、棚架或作綠籬，在日本和歐美等國家被廣泛用于庭園中，相比之下目前我國鐵線蓮屬植物在園林中的應用不多，引種栽培的范圍也較小。目前國內市場銷售的鐵線蓮栽培種類多來自歐洲，沒有我國自主產權的品種，同時，許多國外品種在栽培過程中不能適應江南地區夏季濕熱氣候，出現枝葉大量枯萎的情況，嚴重影響了觀賞效果。國內有關鐵線蓮屬植物育種及繁殖技術的報道很少，僅涉及東北鐵線蓮、鈍萼鐵線蓮等少數幾種。

目前國內對鐵線蓮屬植物的研究主要集中在種質資源調查、系統分類研究和栽培繁殖等方面。鐵線蓮屬植物存在結實少或萌發時間長、發芽率低等問題，不宜采用有性繁殖，園林栽培應用受到限制。

通常情況下，鐵線蓮屬直接不定芽誘導不定芽發生頻率低下，且未見報道。

因此，本領域迫切需要開發一種新型的、可以實現鐵線蓮屬植物的大規模種植的直接不定芽離體發生的方法。

發明內容

本發明的目的在于提供一種新型的、可以實現鐵線蓮屬植物的大規模種植的直接不定芽離體發生的方法。

本發明第一方面提供了一種鐵線蓮屬植物的繁殖方法，包括步驟：

(a)將所述鐵線蓮屬植物的莖段無菌培養獲得帶腋芽的莖段；

(b)切除所述步驟(a)獲得的莖段的腋芽后，將所述莖段進行誘導培養，長出不定芽；和

(c)對所述步驟(b)獲得的不定芽進行培養，生根獲得植株。

在另一優選例中，所述步驟(a)中，所述莖段的長度為0.3-5cm，較佳地，0.5-4cm，更佳地，0.6-2cm。

在另一優選例中，所述步驟(a)中，將所述莖段置于含0.1-10mg/L BA和0.01-1mg/L NAA)的ML培養基上，于23±1℃無菌培養，所述莖段萌發獲得所述帶腋芽的莖段。

在另一優選例中，所述步驟(a)中，將所述種子置于含0.5-8mg/L BA和0.05-0.8mg/L NAA的ML培養基上，于23±1℃無菌培養，所述莖段萌發獲得所述帶腋芽的莖段。

在另一優選例中，所述步驟(a)中，將所述種子置于含0.8-2mg/L BA和0.08-0.3mg/L NAA的ML培養基上，于23±1℃無菌培養，所述莖段萌發獲得所述帶腋芽的莖段。

在另一優選例中，所述步驟(a)中，培養20-30天后莖段開始萌發，莖節開始抽出腋芽，4-6周后新抽出的腋芽開始重新分節，抽芽率為95-100％。