[發明專利]美花石斛化學小分子成分的相關特征指紋圖譜的建立方法

有效

• 申請號: 201611191142.6
• 申請日: 2016-12-20
• 公開（公告）號: CN108205029B
• 公開（公告）日: 2020-12-25
• 發明（設計）人: 趙田;鄒婷婷
• 申請（專利權）人: 北京藍標一成科技有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 北京領科知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 11690
• 代理人: 張丹

本發明公開了一種美花石斛的化學小分子成分的相關特征指紋圖譜的建立方法，包括：1)對樣本容量為n的樣本分別進行色譜檢測，獲取以化學小分子成分夏佛托苷和/或柚皮素作為參照成分的檢測數據；2)對樣本分別進行的指紋圖譜檢測，獲取以美花石斛的全化學成分的指紋圖譜峰面積值；3)以色譜數據中夏佛托苷和/或柚皮素的成分含量值作為響應變量，將指紋圖譜中其它成分的峰面積值作為自變量建立分析模型；4)通過變量相關系數指標表征自變量對回歸建模的貢獻程度，建立化學小分子成分的相關特征指紋圖譜。本發明實現了化學小分子成分含量的關聯性分析，能有效鑒別、控制以及評價美花石斛藥材的質量。

技術領域

本發明屬于中藥成份檢測分析領域，具體涉及一種美花石斛的指紋圖譜的分析建模方法。

背景技術

石斛是一種常用的滋補中藥，主要為石斛屬植物。石斛屬植物是蘭科植物中最大的一個屬，包括鐵皮石斛、美花石斛、密花石斛、鼓槌石斛等多個品種。在全球范圍內，約有1100多種石斛，其中在我國發現的有76種。石斛的藥用歷史悠久。早在古代，石斛在《神農本草經》中就被列為滋補上品，長久以來，隨著時代的發展，石斛一直被人們視為珍貴的中草藥，具有十分重要的滋補功效。在臨床上，石斛被用于治療多種疾病，具有增強免疫力、抗氧化、降血糖和抑制癌癥等藥理功效。由于人為長期無節制采挖及不合理利用石斛，其野生資源日趨減少，市場上出現了一些以假亂真、以次充好的現象。此外，由于石斛品種較多，其品種間的雜交使得其近緣的種存在性狀交叉現象，分類區別比較困難。因此，有必要建立石斛的特征指紋圖譜對石斛鮮品、干品的藥材質量進行評價。美花石斛(Dendrobiumloddigesii Rolfe.)：又名環草石斛、蟠龍石斛。莖柔弱，常下垂，細圓柱形，長10cm～30cm，直徑0.2cm～0.4cm，有時分枝，具多節，節間長1.5cm～2cm，干后金黃色；葉基部具鞘，葉鞘膜質，干后鞘口常張開。總狀花序側生于具葉的老莖上部，具1朵～2朵花；花序柄長0.2cm～0.3cm，基部具1枚～2枚短的、杯狀膜質鞘；花白色或紫紅色；花苞片膜質，卵形，長0.2cm，先端鈍；花梗和子房淡綠色，長2cm～3cm；中萼片卵狀長圓形，長1.7cm～2cm，寬0.6cm～0.7cm，先端銳尖，具5條脈；側萼片披針形，長1.7cm～2cm，寬0.6cm～0.7cm，先端急尖，具5條脈，基部歪斜；萼囊近球形，長約0.5cm；花瓣橢圓形，與中萼片等長，寬0.8cm～0.9cm，先端稍鈍，全緣，具3條～5條脈；唇瓣近圓形，直徑1.7cm～2cm，上面中央金黃色，周邊淡紫紅色，稍凹，邊緣具短流蘇，兩面密布短柔毛；蕊柱白色，正面兩側具紅色條紋，長約0.4cm；藥帽白色，近圓錐形，密布細乳突狀毛，前端邊緣具不整齊的齒。

色譜指紋圖譜是一種綜合的、可量化的鑒別手段，作為一種全局分析的全景模式，反映的是樣品的整體情況,而對單一化學小分子成分的含量解釋不具有針對性。迄今為止，有關藥用石斛HPLC指紋圖譜的專利有1項(CN200810218494.5)，成金樂等對石斛中的酚類和黃酮類成分進行了HPLC指紋圖譜分析。此方法適合于酚類和黃酮類這兩類成分的質量控制。另一方面，在色譜指紋圖譜分析過程中，很多數據都是高維的，即數據包含很多屬性或特征，比如有關美花石斛色譜指紋圖譜，就能更好地對美花石斛進行描述，但在實際應用中對高維數據直接進行操作將會面臨“維數災難”的問題，“維數災難”會導致建模過程所需要的樣本數隨著維數升高而呈指數級增長。面對高維數據，常規的最小二乘方法不再適用，為了提高模型的可解釋性和預測的準確度，變量選擇變得很重要。如何高效地從眾多的變量中篩選出對響應變量有重要作用的若干個變量，是在對指紋圖譜進行分析時亟需解決的問題。

另外，在現有的石斛檢測標準中都是檢測其中的多糖等大分子藥效成分，但是，檢測多糖等大分子成分需要的技術、儀器要求高，國內現有的儀器設備通常無法準確檢測大分子成分，無法準確評價石斛的質量。

發明內容

本發明建立了美花石斛化學小分子成分的相關特征指紋圖譜，通過該圖譜實現對美花石斛藥材相關化學小分子成分含量的關聯性分析。采用化學小分子成分的相關特征指紋圖譜獲取反映藥用美花石斛相關化學小分子成分含量的信息。