[發明專利]鐵皮石斛化學小分子成分的相關特征指紋圖譜的建立方法

有效

• 申請號: 201611190853.1
• 申請日: 2016-12-20
• 公開（公告）號: CN108205037B
• 公開（公告）日: 2020-12-29
• 發明（設計）人: 鄒婷婷;劉仲健
• 申請（專利權）人: 北京藍標一成科技有限公司
• 主分類號: G01N30/86
• 分類號: G01N30/86
• 代理公司: 北京領科知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 11690
• 代理人: 張丹

1.一種鐵皮石斛的化學小分子成分的相關特征指紋圖譜的建立方法，其特征在于，所述相關特征指紋圖譜的建立方法包括：

1)對樣本容量為n的樣本分別進行色譜檢測，獲取以化學小分子成分夏佛托苷和/或柚皮素作為參照成分的檢測數據，所述n為不小于10的整數；

2)對樣本分別進行指紋圖譜檢測，獲取以鐵皮石斛的全化學成分的指紋圖譜峰面積值；

3)以色譜數據中夏佛托苷和/或柚皮素的成分含量值作為響應變量，將指紋圖譜中其它成分的峰面積值作為自變量建立分析模型，進行主成分提取和回歸計算，建立小分子成分與指紋圖譜線性回歸模型，并得到回歸方程；

4)通過變量相關系數指標(Correlation Coefficient)表征自變量對回歸建模的貢獻程度，對應的相關系數越大的自變量的重要程度越大，獲得和小分子成分密切相關的指紋圖譜特征峰群，建立化學小分子成分的相關特征指紋圖譜；

所述步驟3)中所述的建立分析模型包括以下步驟：

a)當色譜數據呈現超高維情形時，采用SIS(Sure Independence Screening)方法將超高維降到d維；其中，d＝n或者

b)在SIS方法降維之后，采用SCAD(Smooth Clipped Absolute Deviation)方法和/或HTR(Hard Thresholding Rule)方法篩選變量。

2.如權利要求1所述的化學小分子成分的相關特征指紋圖譜的建立方法，其特征在于，步驟1)所述的色譜檢測還包括鐵皮石斛樣品處理方法：

所述樣品處理方法包括：

精密稱取鐵皮石斛粉末，置100ml容量瓶中，每1g樣品精密加體積比為75:25的甲醇-水50ml，以250W功率、40kHz頻率超聲處理30分鐘，冷卻后過濾，將濾液旋蒸濃縮至干，每1g鐵皮石斛粉末對應地用5ml體積比為75:25的甲醇-水溶解，上清液過0.45μm微孔濾膜，取續濾液，即得鐵皮石斛的小分子成分含量測定樣品。

3.如權利要求1或2所述的化學小分子成分的相關特征指紋圖譜的建立方法，其特征在于，步驟1)所述的色譜檢測的檢測條件包括：

含量測定色譜條件：Grace Allitima C18色譜柱；流動相采用二元梯度洗脫系統，A相：0.2％醋酸-水，B相：乙腈；以波長290nm測定柚皮素，以波長334nm測定夏佛托苷，參比波長500nm，柱溫30℃；流速1.0mL/min，進樣量20μL；洗脫梯度為：

T（min） B相（乙腈）

0 15%

12 20%

35 60%

45 95%；

步驟2)所述的指紋圖譜的檢測條件包括：

指紋圖譜色譜條件：Grace Allitima C18色譜柱，250mm×4.6mm，5μm；流動相：A相：0.4％乙酸+20mmol/L醋酸銨水溶液，B相：乙腈；梯度洗脫：0～12min：2％～15％B相，12～35min：15％～24％B相，35～45min：24％～36％B相，45～60min：36％～75％B相，60～80min：75％～95％B相；流速1.0mL/min；柱溫30℃；進樣量20μL；檢測波長280nm。