[發明專利]蛹蟲草提取物及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 201611188265.4
• 申請日: 2016-12-20
• 公開（公告）號: CN106727732B
• 公開（公告）日: 2020-06-19
• 發明（設計）人: 孫晶波;杜培革;侯志東;安麗萍;苑廣信;趙南晰;韓笑;徐廣宇;李洪宇;郭笑;盛瑜;王曼力
• 申請（專利權）人: 北華大學
• 主分類號: A61K36/068
• 分類號: A61K36/068;A61P3/10;A61P5/50;A23L33/00
• 代理公司: 廣州新諾專利商標事務所有限公司 44100
• 代理人: 李小林

本發明涉及一種蛹蟲草提取物及其制備方法和應用，屬于天然活性產物技術領域。該制備方法包括以下步驟：制備醇提物：取蛹蟲草，加入體積百分濃度為80?100％的乙醇水溶液作為提取溶劑，加熱提取，然后去除固體不溶物，得醇提液，回收所述醇提液中的溶劑，得醇提物，即為蛹蟲草提取物。采用上述方法制備得到的蛹蟲草提取物，對蛋白酪氨酸磷酸酶1B(PTP1B)的抑制作用，可用于開發制備降血糖、防治胰島素抵抗、糖尿病的藥物中。

技術領域

本發明涉及天然活性產物技術領域，特別是涉及一種蛹蟲草提取物及其制備方法和應用。

背景技術

糖尿病(Diabetes mellitus，DM)是一種以高血糖為特征的慢性代謝性疾病。近年來，社會不斷進步，人民生活水平不斷提高，糖尿病的發病率也不斷升高，糖尿病已經成為嚴重危害人類生命健康的惡性疾病之一，臨床上以高血糖為主要特點。我國目前糖尿病的總體患病率已達9.7％，同期糖尿病前期的患病率高達15.5％。根據調查結果所做出的推算顯示，我國總糖尿病患病人數達9千 2百萬以上，糖尿病前期人數達1億4千8百萬以上。

近年來的研究發現，蛋白酪氨酸磷酸酶(Protein Tyrosine Phosphatase，PTP)與2型糖尿病的胰島素信號傳導、高血脂、肥胖密切相關。PTPs家族可分為 8個亞族：①酪氨酸特異性PTPs，②雙特異性PTPs，③細胞分裂周期蛋白 25(cdc25)亞族，④第10號染色體缺失的磷酸酶和張力蛋白同源基因(PTEN) 亞族，⑤Myotubularins，⑥再生肝磷酸酶(PRL)亞族，⑦低分子量PTPs，⑧新發現的cdc14亞族。其中，與胰島素信號調節緊密相關的是酪氨酸特異性 PTPs。PTP1B是胞內PTPs的代表，是第一個被鑒定并純化的哺乳動物PTP，廣泛表達于肌肉、心、肝、腎、腦等各種組織中。

PTP-1B在胰島素抵抗中發揮了重要的作用，是胰島素信號轉導中一個十分關鍵的分子，可以負性調節胰島素和瘦素的信號轉導。胰島素信號傳導首先需要胰島素與胰島素受體結合。胰島素受體是由α₂β₂亞單位組成的四聚體，α亞單位與胰島素結合后β亞單位的酪氨酸及胰島素受體底物發生磷酸化而被激活。磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol3-kianse，PI3K)等下游蛋白也被活化，葡萄糖轉運蛋白4由細胞內轉至細胞膜，最終葡萄糖進入細胞。在上述過程中的磷酸化反應可以被PTP-1B等因子逆轉，從而阻止胰島素信號的傳導。如果PTP-1B結構或活性改變，將改變其對胰島素信號傳導的抑制作用。

外周組織胰島素抵抗和胰島β細胞功能受損是2型糖尿病發病機制的兩個基本條件，而胰島素信號傳導被抑制是胰島素抵抗的重要環節。PTP-1B升高表達可引起胰島素抵抗，從而引發2型糖尿病。有資料表明，PTP-1B的表達水平在發生糖尿病或胰島素抵抗時明顯升高。使轉基因鼠表達人PTP-1B的有關研究中發現，與對照組相比，實驗組鼠肌肉中胰島素刺激引起的胰島素受體酪氨酸磷酸化水平降低35％，PI3K活性降低40％～60％，葡萄糖轉運所需的蛋白激酶c活性也減弱；表達PTP-1B的小鼠全身葡萄糖清除和肌肉的葡萄糖攝取減少了40％～50％。并有研究表明體重指數正常的初診2型糖尿病較正常對照者存在明顯的胰島素抵抗，而PTP-1B在前者內臟脂肪組織中的表達較后者顯著增高，幾乎是后者的4倍。可見內臟脂肪組織PTP-1B的表達升高在胰島素抵抗中也有重要作用。另有研究報道采用PTP-1B反義寡核苷酸處理糖尿病模型小鼠(ob/ob小鼠)，抑制其PTP-1B表達，發現在肝、脂肪和骨骼肌內PTP-1B的表達下調時，ob/ob小鼠血糖恢復正常，與糖代謝有關的各個指標也都趨于正常。

以上結果說明，PTP-1B在拮抗胰島素信號傳導中具有重要作用。糖尿病患者體內PTP，尤其是PTP-1B的含量及活性的異常可能存在多方面的原因，基因變異被認為是主要因素。有研究表明，先用限速酶AVAI對653個樣本的一種單核苷酸多肽鏈消化，再利用外顯子PCR放大技術對其編碼發現，帶有 PTP981T/981C基因型的人群患2型糖尿病的概率大大增加。