[發明專利]一種生產低聚木糖和抗菌肽的益生飼用釀酒酵母

有效

• 申請號: 201611186554.0
• 申請日: 2016-12-20
• 公開（公告）號: CN106636176B
• 公開（公告）日: 2018-05-04
• 發明（設計）人: 張宏剛;李莉
• 申請（專利權）人: 廣州格拉姆生物科技有限公司
• 主分類號: C12N15/81
• 分類號: C12N15/81;C12N1/19;C12N15/66;C12P19/12;C12P19/04;C12P19/00;C07K14/435;C07K14/46;C07K7/08;C12R1/865
• 代理公司: 廣州嘉權專利商標事務所有限公司44205
• 代理人: 胡輝,舒勝英

1.一種能生產低聚木糖和抗菌肽的釀酒酵母多基因共表達載體，其特征在于：該載體中含有β-1,4-內切木聚糖酶基因、β-1,4-木糖苷酶基因、抗菌肽基因；

所述β-1,4-內切木聚糖酶基因的堿基序列如SEQ ID NO：1所示；

所述β-1,4-木糖苷酶基因的堿基序列如SEQ ID NO：2所示；

所述抗菌肽基因選自東方鈴蟾抗菌肽BLP-2突變體BLP-2-T、異色瓢蟲抗菌肽Haxy-Col1突變體Haxy-Col1-T、鯰魚抗菌肽突變體、脆皮蛙抗菌肽突變體Lf-cath-T；

所述東方鈴蟾抗菌肽BLP-2突變體BLP-2-T的堿基序列如SEQ ID NO：3所示；

所述異色瓢蟲抗菌肽Haxy-Col1突變體Haxy-Col1-T的堿基序列如SEQ ID NO：4所示；

所述鯰魚抗菌肽突變體的堿基序列如SEQ ID NO：5所示；

所述脆皮蛙抗菌肽突變體Lf-cath-T的堿基序列如SEQ ID NO：6所示。

2.根據權利要求1所述的一種能生產低聚木糖和抗菌肽的釀酒酵母多基因共表達載體，其特征在于：所述抗菌肽基因上游存在α-信號肽基因序列，α-信號肽基因的堿基序列如SEQ ID NO：7所示。

3.根據權利要求1所述的一種能生產低聚木糖和抗菌肽的釀酒酵母多基因共表達載體，其特征在于：所述β-1,4-內切木聚糖酶基因的啟動子為pgk1-1，其堿基序列如SEQ ID NO：8所示，終止子為pgkt1-1，其堿基序列如SEQ ID NO：9所示；

所述β-1,4-木糖苷酶基因的啟動子為pgk1-2，其堿基序列如SEQ ID NO：10所示，終止子為pgkt1-2，其堿基序列如SEQ ID NO：11所示；

所述抗菌肽基因的啟動子為pgk1-3，其堿基序列如SEQ ID NO：12所示，終止子為pgkt1-3，其堿基序列如SEQ ID NO：13所示。

4.根據權利要求1所述的一種能生產低聚木糖和抗菌肽的釀酒酵母多基因共表達載體，其特征在于：所述載體的篩選基因中含有G418抗性基因。

5.根據權利要求1所述的一種能生產低聚木糖和抗菌肽的釀酒酵母多基因共表達載體，其特征在于：所述載體的骨架為pGAPZaA質粒。

6.根據權利要求1所述的一種能生產低聚木糖和抗菌肽的釀酒酵母多基因共表達載體，其特征在于：所述載體中含有釀酒酵母菌的25s rDNA基因片段，其堿基序列如SEQ ID NO：15所示。

7.一種能生產低聚木糖和抗菌肽的釀酒酵母，其特征在于，所述釀酒酵母的基因組中插入有權利要求1~6任一所述的多基因共表達載體。