[發明專利]一種海洋合生元添加劑及其在刺參養殖中的應用

在審

• 申請號: 201611184560.2
• 申請日: 2016-12-20
• 公開（公告）號: CN106578731A
• 公開（公告）日: 2017-04-26
• 發明（設計）人: 徐永平;李淑英;王熙濤
• 申請（專利權）人: 大連賽姆生物工程技術有限公司
• 主分類號: A23K50/80
• 分類號: A23K50/80;A23K10/18;A23K20/163;A23K10/20;A23K10/37
• 代理公司: 大連智高專利事務所(特殊普通合伙)21235
• 代理人: 胡景波

技術領域

本發明涉及解淀粉芽孢桿菌-海洋活性寡糖合生元研制方法及其在刺參養殖中的應用。

背景技術

刺參是中國20多種可食用海參中品質最好的一種，位列海產八珍之首，具有極高的營養價值和經濟價值。近十多年來，刺參養殖業發展迅猛，2013年全國刺參產量超過13×104噸，產值突破300億元，在水產養殖行業單種產值和利潤中最高，其發展速度和綜合經濟效益都是其他經濟水產品種所無法比擬的。隨著刺參產業向高密度集約化方式轉變，刺參養殖的健康和病害問題日益凸顯，腐皮綜合征等疾病頻發，導致生產性能降低，嚴重制約了刺參產業健康和可持續發展。雖然使用抗生素和化學藥物防治水生動物疾病具有一定的效果，但是會導致細菌出現抗藥性、藥物殘留及破壞動物與環境中正常菌群平衡等諸多弊端。隨著現代水產養殖業逐步向綠色、環保和無公害方向發展，益生菌和益生元等天然綠色飼料添加劑因具有利于腸道及水體微生態群系平衡、促進動物生長及增強免疫應答，可為宿主帶來諸多益處，且綠色安全、無污染，逐漸成為水產養殖領域研究的焦點。

發明內容

本發明的目的在于高效科學配伍益生菌及益生元，從而顯著提高刺參的生長性能及非特異性免疫應答，以保證刺參產業健康可持續性發展。

為了達到上述目的，本發明提供了一種海洋合生元添加劑，該添加劑包含源自海洋、具有生物活性的海洋寡糖類益生元——褐藻寡糖，以及能利用褐藻寡糖作為能源物質生長的解淀粉芽孢桿菌(Bacillus amyloliquefaciens)WB1。所述的菌株WB1已提交保藏，具體保藏信息如下：

保藏單位名稱：中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(CGMCC)；

保藏單位地址：北京市朝陽區北辰西路1號院3號，中國科學院微生物研究所；

保藏日期：2014年2月27日；

保藏編號：CGMCC No.8873；

所述解淀粉芽孢桿菌與上述寡糖類益生元科學配伍，制備出的海洋合生元添加劑為可用于刺參養殖促進其生長及增強免疫力的新型合生元添加劑；

上述海洋合生元添加劑的組成包括：

解淀粉芽孢桿菌WB1、海洋寡糖類益生元、菌體保護劑、植物源載體；

所述海洋益生元褐藻寡糖的聚合度為2～10；

所述褐藻寡糖分子量<2000；

所述菌體保護劑為脫脂奶粉、甘油、蔗糖或明膠；優選脫脂奶粉；

所述植物源載體為玉米芯粉、稻殼粉或麩皮；優選玉米芯粉。

優選方式下，所述海洋合生元添加劑各組分的配比為：

濃度大于等于1×10¹⁰CFU/mL的解淀粉芽孢桿菌WB1菌液中加入占所述菌液質量5～8％的海洋寡糖類益生元、占所述菌液質量5～10％的菌體保護劑后得到的溶液與所述植物源載體按體積質量比1:0.25ml/g混合，凍干。

進一步優化，解淀粉芽孢桿菌WB1菌液濃度等于1×10¹⁰CFU/mL，加入的海洋寡糖類益生元占所述菌液質量5％、菌體保護劑占所述菌液質量的10％。

本發明解淀粉芽孢桿菌WB1對刺參沒有安全性風險，無致病性，可作為刺參的益生菌使用。

上述解淀粉芽孢桿菌WB1特征如下：白色，半透明，光滑濕潤菌落，稍隆起，圓形齊整菌落；革蘭氏染色陽性，細胞呈桿狀，運動，好氧，可耐1％～10％NaCl濃度，在褐藻寡糖選擇性培養基上菌落形態為褐色，圓形，邊緣整齊，最適生長pH為6.5～7.5，最適生長溫度25～35℃。

本發明還提供了上述海洋合生元添加劑的制備方法，具體步驟如下：

S1、取解淀粉芽孢桿菌WB1菌液，加入海洋寡糖類益生元、菌體保護劑，得到混合液；

所述海洋寡糖類益生元包括聚合度為2～10的褐藻寡糖；

所述褐藻寡糖分子量<2000；

所述菌體保護劑為脫脂奶粉、甘油、蔗糖或明膠；優選脫脂奶粉。

優選方式下，所述解淀粉芽孢桿菌WB1菌液濃度大于等于1×10¹⁰CFU/mL；優選等于1×10¹⁰CFU/mL；

加入的所述海洋寡糖類益生元的量占所述解淀粉芽孢桿菌WB1菌液質量的5～8％；優選5％；

加入的所述菌體保護劑的量占所述解淀粉芽孢桿菌WB1菌液質量的5～10％；優選10％。

所述解淀粉芽孢桿菌WB1菌液的制備方法優選為：