[發(fā)明專利]一種蘿芙木誘導(dǎo)培養(yǎng)基及其應(yīng)用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201611184289.2
• 申請日: 2016-12-20
• 公開（公告）號: CN106577287A
• 公開（公告）日: 2017-04-26
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 胡波;鐘勇財(cái);謝玉國
• 申請（專利權(quán)）人: 江西宜信堂醫(yī)療科技有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 北京精金石專利代理事務(wù)所(普通合伙)11470
• 代理人: 劉曄

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于組織培養(yǎng)技術(shù)的植物再生領(lǐng)域，具體涉及到一種蘿芙木誘導(dǎo)培養(yǎng)基及其應(yīng)用。

背景技術(shù)

蘿芙木：直立常綠灌木，高可達(dá)3m，具乳汁，屬于一種藥材，功能主治鎮(zhèn)靜，降壓，活血止痛，清熱解毒。用于高血壓病，頭痛，眩暈，失眠，高熱不退，外用治跌打損傷，毒蛇咬傷等。蘿芙木根中分離出利血平、阿嗎堿、蘿萊堿、蛇根亭堿、阿嗎靈、山馬蹄堿、蘿芙木甲素、錐洛斯明堿、霹靂蘿芙辛堿、一種單萜類生物堿等多種生物堿，含量為1～2％，其中利血平具有良好的降壓作用。蘿芙木中尚含熊果酸0.2％，熊果酸的抗腫瘤作用廣泛，極有可能成為低毒有效的新型抗癌藥物。因此，蘿芙木具有很高的藥用價(jià)值，而且蘿芙木的種植也已經(jīng)得到國家的推廣。

由于連年的采挖，資源急劇減少，從20世紀(jì)80年代中期開始，生產(chǎn)廠家就把藥用部位由根擴(kuò)展到全株，而且為保護(hù)野生資源，滿足企業(yè)生產(chǎn)需求，越來越多的研究機(jī)構(gòu)開展了蘿芙木規(guī)范化種植研究。

蘿芙木的繁殖主要是種子與扦插繁殖，但是種子繁殖發(fā)芽率低，生長速度慢，周期長等缺點(diǎn)，而扦插繁殖操作復(fù)雜，成活率低等缺點(diǎn)而不能廣泛推廣，因此，為了促進(jìn)蘿芙木快速繁殖，對蘿芙木組織進(jìn)行了培養(yǎng)基的研究，擺脫了外部環(huán)境對植株的影響，而且可以對優(yōu)良的品種進(jìn)行篩選，對品種進(jìn)行優(yōu)化，因此，植物培養(yǎng)基對蘿芙木的快速繁殖十分重要。

《紅果蘿芙木植物組織培養(yǎng)及快速繁殖》，張麗珍，等，江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)出版社，2015年第43卷第6期公開了紅果蘿芙木不同時期的培養(yǎng)基，以紅果蘿芙木莖段為外植體，研究其再生條件，結(jié)果表明：叢生芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基為MS+1.0mg/L6－BA+0.05mg/L IBA；繼代增殖、壯苗培養(yǎng)基分別為MS+0.3～0.5mg/L 6－BA+0.02mg/L IBA、MS+0.1～0.2mg/L 6-BA+0.01mg/L IBA；根分化的最適培養(yǎng)基為1/2MS+0.5mg/L NAA+0.2mg/L IBA。

公開號為101731149A的中國專利申請公開了一種利用組織培養(yǎng)技術(shù)快速繁殖云南蘿芙木的方法，該發(fā)明以蘿芙木嫩枝帶芽莖段作外植體，接種在啟動培養(yǎng)基上誘導(dǎo)腋芽產(chǎn)生，啟動培養(yǎng)基組成為MS+2.0-4.0mg/LBA+0.05-0.1mg/LNAA。增殖培養(yǎng)MS+2.5-5.0mg/LBA+0.1-0.5mg/LNAA，增殖系數(shù)為8-12，每4-5周重復(fù)繼代一次。生根培養(yǎng)基為添加1.0mg/LNAA或IBA或NAA+IBA＝1.0mg/L的1/2MS培養(yǎng)基，5-6周后將生根苗移栽到煉苗基質(zhì)中，20-30℃保濕遮陰煉苗3-4周轉(zhuǎn)栽或大田種植，成活率達(dá)90％。此發(fā)明方法操作簡單，繁殖速度快，遺傳穩(wěn)定性好，為工廠化育苗提供技術(shù)支撐。

但是上述技術(shù)中誘導(dǎo)培養(yǎng)使用的是1個單位的MS培養(yǎng)基，銨態(tài)氮含量過高，容易傷害外植體，造成成活率低。

發(fā)明內(nèi)容

為了解決現(xiàn)有技術(shù)的不足，進(jìn)一步加快蘿芙木組織的誘導(dǎo)繁殖，提高成活率，本發(fā)明公開了一種蘿芙木誘導(dǎo)培養(yǎng)基及其應(yīng)用，本發(fā)明公開的培養(yǎng)基是在改良MS培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上，添加適量的植物激素，并且加入了蘿芙木乳汁，極大地加快了蘿芙木的誘導(dǎo)速度。

本發(fā)明技術(shù)方案如下所示：

一種蘿芙木誘導(dǎo)培養(yǎng)基，所述的誘導(dǎo)培養(yǎng)基組成為2/3MS培養(yǎng)基、0.1-0.2mg/L N-苯基-N’-1,2,3-噻二唑-5-脲、0.1-0.2mg/L 2,4-二氯苯氧乙酸和800-1500mg/L蘿芙木乳汁。

進(jìn)一步的，所述的誘導(dǎo)培養(yǎng)基組成為2/3MS培養(yǎng)基、0.16mg/L N-苯基-N’-1,2,3-噻二唑-5-脲、0.15mg/L 2,4-二氯苯氧乙酸和1200mg/L蘿芙木乳汁。

N-苯基-N’-1,2,3-噻二唑-5-脲：CAS.NO：51707-55-2