[發明專利]干細胞培養上清的生發育發用途、化妝品或皮膚形成促進劑以及蛋白質的離子導入方法

在審

• 申請號: 201611178970.6
• 申請日: 2013-02-08
• 公開（公告）號: CN107049910A
• 公開（公告）日: 2017-08-18
• 發明（設計）人: 上田實;山下靖弘
• 申請（專利權）人: 株式會社加帕尼克
• 主分類號: A61K8/98
• 分類號: A61K8/98;A61K35/28;A61Q19/00;A61Q19/08;A61Q7/00;A61N1/32;A61N1/30
• 代理公司: 北京三友知識產權代理有限公司11127
• 代理人: 丁香蘭,李洋

本申請是分案申請，其原申請的申請號為201380018559.0，申請日為2013年2月8日，發明名稱為“以非人類干細胞的培養上清為原材料的化妝品或皮膚再生促進劑以及蛋白質的離子導入方法”。

技術領域

本發明涉及以選自由非人牙髓干細胞、骨髓干細胞以及脂肪干細胞組成的組中的任意干細胞的培養上清作為原材料的化妝品等。

背景技術

隨著年齡增加、斑和皺紋增加是眾所周知的，已知這是由于隨著年齡增加、暴露于短波長紫外線(UVB)的暴露量也增加而導致的。并且，據認為，UVB會使人真皮中的皮膚成纖維細胞(HDF)所致的膠原酶的產生量增加，因而促進膠原蛋白的分解，誘導變性彈性組織的沉積，其結果皮膚表現出皺紋和黃變。

一直以來，化妝品是以各種植物來源成分為原材料進行制造并使用的，但是，最近以防止年齡增加導致的皮膚衰老(例如皺紋和細紋形成)、改善保濕性等為目的，大量銷售有混配了胎盤素、角鯊烷、膠原蛋白等動物來源成分的化妝品。

另外，出于同樣的目的，還在開發含有細胞的培養上清的化妝品等，提出了以下方案：培養人肺的平滑肌細胞、上皮細胞、成纖維細胞等，將其細胞破碎物或培養上清作為化妝品用組合物使用(參照日本特開2005-336188號公報、下文中稱為現有技術1)。

另外，還已知將由人的骨髓或牙髓等得到的干細胞而非這種細胞的培養上清用作神經疾病治療用醫藥組合物的方法(參照WO 02/086108號公報、下文中稱為現有技術2)。

另外，提出了將人的脫落乳牙的牙髓干細胞(stem cells from exfoliated deciduous teeth；SHED)的培養上清用作損傷部的治療用組合物(參照國際公開WO 2011/118795號公報、下文中稱為現有技術3)。

現有技術文獻

專利文獻

專利文獻1：日本特開2005-336188

專利文獻2：國際公開WO 02/086108號公報

專利文獻3：國際公開WO 2011/118795號公報

發明內容

發明要解決的課題

現有技術1中，提出了將白血病抑制因子(Lymphoma inhibition factor:LIF)、LIF類似物、或者LIF模擬物(下文中集體稱為“LIF等”)混配至化妝品用組合物中的技術?，F有技術1中，若將含有LIF的培養上清添加至冷凍保存的表皮細胞中，則在體外(in vitro)形成品質優良的表皮細胞，從這點出發是優選的。

但是，由于無法保證體外的實驗結果也會直接反映到體內(in vivo)的實驗中，因此存在無法證實混配于化妝品時的效果的問題。

另外，現有技術2使用了與通常的細胞相比增殖能力更高的干細胞，能夠對它們所產生的生物體因子加以利用，從這點出發是優選的技術。

但是，由于使用了人來源的干細胞，因此存在下述問題：(a)隨著年齡增加，能夠采集的干細胞數減少；(b)由于年齡增加，基因的變異累積，因此未必可擔保移植干細胞時的安全性；(c)骨髓干細胞(BMSC)的數量、增殖能力和分化能力隨著年齡而降低，因此雖說是干細胞，細胞增殖能力也低；(d)利用骨髓穿刺采集干細胞對生物體的侵襲度大，伴有危險。另外，使用人的細胞時不僅難以提供充分的干細胞資源，而且在倫理方面也有很多問題。

現有技術3使用了人的牙髓干細胞的培養上清，因此與使用細胞本身時相比安全性更高，從這點出發是優選的技術。

但是，與現有技術2同樣地，雖說是被稱為醫療廢棄物的脫落牙，但仍使用了人的細胞，因而存在倫理方面的問題，而且具有難以提供充分的干細胞資源的問題。

另一方面，具有多能性的干細胞被認為可在皮膚組織、骨組織、肌肉組織及其它各種組織中分化。而且，在老齡人口比例增高的現在，具有針對下述情況的社會性要求：通過對伴隨年齡增加而出現的皮膚損傷、即斑及皺紋的產生進行預防等，將皮膚保持為健康狀態。另外，無論年齡如何，還具有希望解決頭發稀疏、脫發等與毛發有關的煩惱的社會性要求。

另外，具有針對減輕來自UVB的損害、或者改善效果高的化妝品等的強烈的社會性要求。

用于解決課題的方案

本發明的發明人為了解決上述課題進行了反復深入的研究，結果完成了本發明。