[發(fā)明專利]用于環(huán)境中抗生素檢測分析的細菌生物傳感器的制備方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201611175036.9
• 申請日: 2016-12-19
• 公開（公告）號: CN106596648B
• 公開（公告）日: 2019-02-01
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 葉偉偉;孫毅
• 申請（專利權(quán)）人: 寧海縣浙工大海洋研究院
• 主分類號: G01N27/02
• 分類號: G01N27/02
• 代理公司: 杭州斯可睿專利事務(wù)所有限公司 33241
• 代理人: 王利強

1.一種用于環(huán)境中抗生素檢測分析的細菌生物傳感器的制備方法，其特征在于：所述方法包括以下步驟：

(1)氧化鋁納米多孔膜的表面功能化

氧化鋁納米多孔膜用3-(2,3-環(huán)氧丙氧)丙基三甲氧基硅烷進行硅烷化處理后，利用環(huán)氧樹脂膠封于聚二甲基硅氧烷PDMS容器中；加入沙門氏菌抗體溶液，0～4℃下靜置3～6小時后，使得抗體固定在多孔膜上；

往PDMS容器的上下腔以恒定的速率緩慢通入和抽出PBS緩沖液，用于清洗未被固定的沙門氏菌抗體1～3次；將準備好的氧化鋁納米多孔膜器件放在4℃條件下備用；

(2)捕獲細菌：將培養(yǎng)好的沙門氏菌分散在PBS緩沖液中，配成不同濃度的沙門氏菌溶液；取上述準備好的沙門氏菌溶液，加入到步驟(1)中得到的氧化鋁納米多孔膜上，靜置6～10小時后，往PDMS容器的上下腔以恒定的速率緩慢通入和抽出PBS緩沖液，用于清洗未被固定的沙門氏菌1～3次，制備得到基于氧化鋁納米多孔膜的細菌生物傳感器。

2.如權(quán)利要求1所述的用于環(huán)境中抗生素檢測分析的細菌生物傳感器的制備方法，其特征在于：所述方法還包括以下步驟：

(3)抗生素檢測分析：往步驟(2)得到的細菌生物傳感器加入待測試抗生素樣品，抗生素作用一段時間后，往PDMS容器的上下腔以恒定的速率緩慢通入和抽出PBS緩沖液，用于沖去失活的細菌和多余的抗生素1～3次；根據(jù)氧化鋁納米多孔膜兩端阻抗的變化檢測分析待測試樣品中的抗生素。

3.如權(quán)利要求1或2所述的用于環(huán)境中抗生素檢測分析的細菌生物傳感器的制備方法，其特征在于：所述步驟(1)中，沙門氏菌抗體溶液濃度為0.5μg/mL，溶劑為pH 7.4、0.1M的PBS緩沖液。

4.如權(quán)利要求1或2所述的用于環(huán)境中抗生素檢測分析的細菌生物傳感器的制備方法，其特征在于：所述步驟(2)中，沙門氏菌溶液濃度為0.001～10^5CFU/μL，溶劑為pH 7.4、0.1M的PBS緩沖液。

5.如權(quán)利要求2所述的用于環(huán)境中抗生素檢測分析的細菌生物傳感器的制備方法，其特征在于：所述步驟(3)中，抗生素作用時間為5分鐘～5小時。