[發明專利]一種多肽作為B細胞表位或肽半抗原的免疫刺激物構成多肽免疫原及其用途

在審

• 申請號: 201611174266.3
• 申請日: 2016-12-14
• 公開（公告）號: CN108218995A
• 公開（公告）日: 2018-06-29
• 發明（設計）人: 李泰明;顧小騫;李志鑫;方金芝;魏曉敏;孟凱特;焦林芳;馬艷潔
• 申請（專利權）人: 中國藥科大學
• 主分類號: C07K19/00
• 分類號: C07K19/00;A61K39/00;A61P3/10;A61P19/06;A61P13/12;A61P3/06;A61P9/10;A61P19/02;A61P29/00;A61P25/28;A61P27/02;A61P9/00;G01N33/68
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本發明提供了一種含T輔助細胞表位(Th表位)的多肽可作為B細胞表位或肽半抗原的免疫刺激物構成多肽免疫原及其用途。將B細胞表位或肽半抗原通過連接肽和多肽共價連接，形成多肽免疫原，經小鼠多次篩選分析，獲得含該多肽的多肽免疫原，能顯著增強B細胞表位或肽半抗原的免疫原性，產生與目標抗原蛋白特異結合的抗體，顯著增強偏向Th2的免疫調節，改善病癥。同時本發明提供的多肽及含該多肽的免疫原及衍生物和類似物也可以用于重組微生物和能轉基因的動物或植物及細胞，使它們作為生產工廠，能生產疫苗或制作口服疫苗或生產特異抗體及衍生物和改造物，用于防治Th1占優勢的疾病包括但不限于糖尿病及并發癥、類風濕性關節炎等和用于開發檢測試劑。

技術領域

本發明涉及一種含T輔助細胞表位(Th表位)的多肽及其應用，尤其是此多肽用于和B細胞表位或肽半抗原---一種目標抗原蛋白的目標抗原位點共價連接成為新型多肽免疫原，可以作為B細胞表位或肽半抗原的免疫刺激物，增強目標抗原位點(B細胞表位或肽半抗原)的免疫原性并可用于制備特異的與含B細胞表位或肽免疫原的目標抗原蛋白結合的抗體，含有該多肽的新型多肽免疫原及偶聯蛋白和融合蛋白以及基于其生產的特異抗體以及含有該多肽的衍生物和類似物及其基礎上產生的特異抗體和抗體衍生物和類似物的藥物及制劑，在預防和治療Th1占優勢誘導的疾病等方面具有重要應用價值，特異抗體及其衍生物和類似物可檢測相關目標抗原蛋白，開發為檢測試劑。本發明涉及免疫學、藥學及醫學相關領域。

背景技術

人類和動物同樣存在兩個輔助性T淋巴細胞亞群，Th1細胞主要產生Th1類細胞因子IL-2、TNF-β和IFN-γ；Th2細胞主要產生IL-4、IL-5、IL-6、IL-10和IL-13。正常情況下，輔助性T淋巴細胞亞群Th1/Th2細胞處于平衡狀態，但機體發生功能異常時，常表現出平衡偏向其中一方，此即為″Th1/Th2平衡漂移″。習慣上把Th1及其細胞因子占優勢的狀態稱為Th1狀態，Th2及其細胞因子占優勢的狀態稱為Th2狀態。Th1/Th2平衡影響細胞因子網絡的平衡，與許多疾病的發生、發展、治療、轉歸有密切的關系，不同的自身免疫性疾病中，Th1/Th2平衡失調的表現各不相同。類風濕性關節炎、1型糖尿病、多發性硬化及慢性甲狀腺炎等疾病中，Th1或Th1分泌的細胞因子占優勢，Th1誘導發病，加重病情；Th2則能減輕病癥，甚至阻止發病，這與Th1/Th2的炎性及抗炎性反應有關。基于Th1/Th2漂移狀態與各種疾病的關系，越來越多的研究正傾向于發現、開發能逆轉或穩定Th1/Th2狀態的藥物和方法。

表位是蛋白質抗原性的基礎，蛋白質抗原通過表位體現其免疫特性，就某一蛋白質而言，它含有多種表位如B細胞表位又稱抗原決定簇(antigenic determinant，AD)，T輔助細胞(Th)表位等等，還有抑制性表位，毒性表位，交叉反應性表位等等。選擇合適的表位并且通過合適的方法與其他肽或者蛋白質等等連接以及用什么佐劑及劑型，如何免疫等等才能得到理想的多肽和蛋白疫苗，產生特異的高效價(高滴度)抗體是有巨大的挑戰性的。小鼠體內Th1會產生IgG2a亞型抗體，Th2型則會產生IgG1和IgG2b亞型抗體，Th2亞型抗體可以增加Th2型細胞因子的產生并能治療Th1偏高疾病，緩解病癥。

當前判斷疾病免疫發病機制中Th1或Th2細胞效應為主導的方法，主要是依據炎癥組織局部細胞因子的表達，也可根據外周血清中抗體反應亞類的變化進行判斷。在動物模型的研究中，根據干擾Th1或Th2細胞效應的各種環節后Th1或Th2細胞效應的變化來判斷的與Th1偏高相關的人類感染疾病及自免疫性疾病有1型糖尿病及并發癥，腎臟病，腎炎，類風濕性關節炎，反應性關節炎，多發性硬化，自身免疫性甲狀腺炎，接觸性皮炎，結節性紅斑，習慣性流產等等。