[發明專利]一種荷載小干擾RNA的N-琥珀酰殼聚糖納米粒藥物遞送系統及其制備方法和應用

在審

• 申請號: 201611168219.8
• 申請日: 2016-12-16
• 公開（公告）號: CN108201533A
• 公開（公告）日: 2018-06-26
• 發明（設計）人: 樊燕蓉;趙志杰;李曄;夏雪飛;劉海霞;李鵬;徐根興
• 申請（專利權）人: 南京理工大學
• 主分類號: A61K9/51
• 分類號: A61K9/51;A61K31/713;A61K47/36;A61P35/00
• 代理公司: 南京天華專利代理有限責任公司 32218
• 代理人: 傅婷婷;徐冬濤

1.一種荷載小干擾RNA的N-琥珀酰殼聚糖納米粒藥物遞送系統，其特征在于包括N-琥珀酰殼聚糖及其荷載的小干擾RNA。

2.根據權利要求1所述的一種荷載小干擾RNA的N-琥珀酰殼聚糖納米粒藥物遞送系統，其特征在于所述的藥物遞送系統為N-琥珀酰殼聚糖在水溶液中與化學合成的小干擾RNA自組裝形成的帶正電荷的納米粒。

3.根據權利要求1所述的一種荷載小干擾RNA的N-琥珀酰殼聚糖納米粒藥物遞送系統，其特征在于納米粒粒徑分布在189～258nm，納米粒表面Zeta電位+8～+18mv；載藥納米粒呈不規則球狀。

4.根據權利要求1所述的一種荷載小干擾RNA的N-琥珀酰殼聚糖納米粒藥物遞送系統，其特征在于所述的小干擾RNA選自化學修飾或不修飾的兩條鏈對稱的小核酸干擾分子，或者化學修飾或不修飾的兩條鏈配對不對稱的小核酸干擾分子。

5.根據權利要求4所述的一種荷載小干擾RNA的N-琥珀酰殼聚糖納米粒藥物遞送系統，其特征在于所述的兩條鏈對稱的小核酸干擾分子為正義鏈與反義鏈長度一致，能抑制目的基因表達，長度為19-25nt的雙鏈配對的siRNA，每條鏈3’端含有2-4個UU堿基或脫氧核糖核酸dTdT呈單鏈懸掛。

6.根據權利要求4所述的一種荷載小干擾RNA的N-琥珀酰殼聚糖納米粒藥物遞送系統，其特征在于所述的兩條鏈配對不對稱的小核酸干擾分子是從靶基因對稱性小干擾RNA分子siRNA出發，通過將siRNA正義鏈或反義鏈5’或3’端裁剪1-5nt堿基，形成兩條鏈堿基長度不一致，每條鏈3’端有2-4個UU堿基或脫氧核糖核酸dTdT呈單鏈懸掛，具有14-21nt的能誘發RNA干擾的雙鏈不對稱小核酸干擾分子aiRNA。

7.根據權利要求4～6中任一項所述的一種荷載小干擾RNA的N-琥珀酰殼聚糖納米粒藥物遞送系統，其特征在于所述的化學修飾為膽固醇修飾的小干擾RNA。

8.權利要求1～6中任一項所述的荷載小干擾RNA的N-琥珀酰殼聚糖納米粒藥物遞送系統的制備方法，其特征在于包括N-琥珀酰殼聚糖在水溶液中與化學合成的小干擾RNA通過自組裝形成帶正電荷的納米粒。

9.根據權利要求8所述的制備方法，其特征在于包括如下步驟：

(1)間歇式濃堿法對殼聚糖進行乙?；拿摮?，制備得到高脫乙酰度殼聚糖，采用雙氧水氧化降解法對高脫乙酰度殼聚糖進行降解，攪拌反應20-30min，獲得相對低分子質量殼聚糖，其粘均分子量4400～21000道爾頓；以低相對分子質量殼聚糖和丁二酸酐反應，采用乙酸/丙酮體系，室溫下合成N-琥珀酰殼聚糖，所制備的N-琥珀酰殼聚糖取代度為0.58；

(2)取N-琥珀酰殼聚糖溶于2％乙酸溶液中，配制成5mg/mL的N-琥珀酰殼聚糖溶液，經#3砂芯漏斗初濾，取濾液與aiRNA或siRNA溶液混合放入50-55℃恒溫水浴，保溫10-15min即得所述的荷載小干擾RNA的N-琥珀酰殼聚糖納米粒藥物遞送系統。

10.權利要求1所述的荷載小干擾RNA的N-琥珀酰殼聚糖納米粒藥物遞送系統在制備靶向治療藥物中的應用；優選在制備抗腫瘤靶向治療藥物中的應用。