[發(fā)明專利]一種異常黏液質(zhì)型陽痿病證哺乳動物血清和陰莖平滑肌組織差異蛋白體系及篩選方法與應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201611167384.1
• 申請日: 2016-12-16
• 公開（公告）號: CN106645748B
• 公開（公告）日: 2018-08-14
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 阿地力江·伊明;馬文靜;斯依提·阿木提
• 申請（專利權(quán)）人: 新疆醫(yī)科大學(xué)
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68
• 代理公司: 北京高沃律師事務(wù)所 11569
• 代理人: 王加貴

本發(fā)明提供了維醫(yī)異常黏液質(zhì)型陽痿病證的哺乳動物血清差異蛋白和陰莖平滑肌組織差異蛋白體系，以及上述差異蛋白體系的篩選方法，包括1)正常對照組、造模證侯組與病證組；2)采集全血，分離血清與陰莖平滑肌組織；3)提取蛋白質(zhì)；4)標(biāo)記后純化；5)質(zhì)譜檢測后得到指紋圖譜，篩選后進行蛋白質(zhì)組學(xué)分析，獲得所述證候組、病證組和正常對照組血清蛋白質(zhì)和陰莖平滑肌組織蛋白質(zhì)；6)統(tǒng)計、比較、篩選得到維醫(yī)異常黏液質(zhì)型陽痿病證血清差異蛋白質(zhì)和陰莖平滑肌組織差異蛋白質(zhì)，為進一步開展異常黏液質(zhì)型陽痿(勃起功能障礙)病證機制研究、藥物篩選、轉(zhuǎn)化與防治研究奠定了基礎(chǔ)，提供了依據(jù)。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種維醫(yī)異常黏液質(zhì)型陽痿病證的哺乳動物血清和陰莖平滑肌組織差異蛋白及其篩選方法與應(yīng)用。

背景技術(shù)

維吾爾醫(yī)(維醫(yī))學(xué)是祖國傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)中重要組成部分，維醫(yī)學(xué)體液論認為，人體由膽液質(zhì)、血液質(zhì)、黏液質(zhì)和黑膽質(zhì)4種體液質(zhì)組成，上述4種體液質(zhì)的動態(tài)平衡是機體健康的生理基礎(chǔ)，而某一種體液質(zhì)的量或/和質(zhì)的變化，引起體液質(zhì)平衡失調(diào)，產(chǎn)生一種異常體液質(zhì)證(證候)，與多種疾病的發(fā)生存在因果關(guān)系。體液病理學(xué)(體液論)是維醫(yī)理論根基，其認為4種體液中，黏液質(zhì)體液屬性濕寒，常易因生活、飲食與環(huán)境因素、工作壓力、缺乏運動等原因?qū)е麦w內(nèi)體液平衡遭到破壞，黏液質(zhì)體液發(fā)生改變，產(chǎn)生異常黏液質(zhì)，致代謝水平降低，產(chǎn)物蓄積體內(nèi)，進而導(dǎo)致病理性改變，引發(fā)相關(guān)疾病。

臨床研究證實，異常黏液質(zhì)證(Abnormal Phlegm)在陽痿(陰莖勃起功能障礙)、早泄、少弱精癥、卵巢早衰、不孕不育等生殖疾病、肥胖癥、高脂血癥等代謝性疾病和心血管疾病發(fā)生過程中，處于主導(dǎo)地位，可能也是腫瘤、糖尿病、高血壓等復(fù)雜性疾病發(fā)生早期的主要證型。勃起功能障礙(Erectile Dysfunction，ED)，又稱陽痿，是指男子陰莖不能勃起及不能維持勃起而完成滿意的性生活，屬維醫(yī)優(yōu)勢病種。陰莖勃起是由多種生物活性因子(包括神經(jīng)遞質(zhì)，激素，酶，離子通道等)綜合調(diào)節(jié)的神經(jīng)-血管性生物活動。在維醫(yī)藥臨床與基礎(chǔ)研究方向，因?qū)嶒瀯游飳W(xué)起步較晚，無相關(guān)病證結(jié)合動物模型，導(dǎo)致異常黏液質(zhì)型陽痿病證及其對證方藥作用機理研究一直滯后，并嚴重制約了維醫(yī)男科在此領(lǐng)域的研究與發(fā)展，更無關(guān)于異常黏液質(zhì)型陽痿病證的相關(guān)標(biāo)志蛋白及其蛋白標(biāo)志物體系的研究報道。

為了從現(xiàn)代生殖生物學(xué)角度進一步認識維醫(yī)異常黏液質(zhì)型陽痿，我們基于維醫(yī)體液論和造模理念，成功建立了異常黏液質(zhì)證候動物模型，并采用APO陰莖勃起實驗與交配實驗結(jié)合的方法，從中篩選出ED模型，對其生物學(xué)表征、性功能與交配行為、性腺軸與NO-CGMP信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路等生殖生物學(xué)方面的改變進行了研究，但異常黏液質(zhì)型陽痿病證并非是單一生殖器官即陰莖平滑肌組織的的疾病，而是全身性疾病，因此需要我們用整體觀念，從全身的視野，來分析、研究和探索該病證的發(fā)生發(fā)展規(guī)律與可能的治療方法。維醫(yī)辨證分型的起點和核心是維醫(yī)“體液論”，其出發(fā)點是人體內(nèi)在體液動態(tài)變化的外在表現(xiàn)，而維醫(yī)藥學(xué)所推崇的辨證施治也是依據(jù)個體的整體水平上發(fā)生的體液表型差異，這與系統(tǒng)生物學(xué)整體研究思路不謀而合。

血清融入了機體多器官、組織和細胞的蛋白質(zhì)動態(tài)信息，也是與陰莖勃起功能密切相關(guān)的分泌蛋白必經(jīng)之路，可以反映機體的病理生理改變相關(guān)的總體調(diào)控網(wǎng)絡(luò)的時空性，而藥物對任何靶器官、組織或細胞的作用最終也反映在血清蛋白質(zhì)組變化之中。陰莖是陰莖勃起的效應(yīng)器官，海綿體平滑肌則為效應(yīng)組織，其任何一種病理勝利改變也與該組織蛋白質(zhì)水平動態(tài)變化密不可分，其中蘊藏著陽痿發(fā)生相關(guān)的潛在蛋白標(biāo)記，也是該疾病藥物治療的重要靶點之一。

故，本研究基于異常黏液質(zhì)證候與病證結(jié)合動物模型基礎(chǔ)上，開展了血清和陰莖平滑肌組織的蛋白質(zhì)組學(xué)研究，建立了異常黏液質(zhì)型陽痿病證相關(guān)血清和陰莖平滑肌組織蛋白體系，為進一步開展異常黏液質(zhì)型陽痿病證的機制研究、藥物篩選、轉(zhuǎn)化與防治研究奠定了基礎(chǔ)。

發(fā)明內(nèi)容

有鑒于此，本發(fā)明的第一目的在于提供維醫(yī)異常黏液質(zhì)型陽痿病證的哺乳動物血清差異蛋白體系，包括以下蛋白：