[發明專利]一種檢測偽狂犬病毒的核酸組合、試劑盒及應用

有效

• 申請號: 201611159628.1
• 申請日: 2016-12-15
• 公開（公告）號: CN106591490B
• 公開（公告）日: 2020-06-30
• 發明（設計）人: 周遠成;蔡雨函;鄧靜;王翱;李碧;卓秀萍;牛婷;鐘穎;陰文奇;鄺聲耀
• 申請（專利權）人: 畜科生物工程有限公司
• 主分類號: C12Q1/70
• 分類號: C12Q1/70;C12Q1/686;C12N15/11
• 代理公司: 成都正華專利代理事務所(普通合伙) 51229
• 代理人: 李蕊

一種檢測偽狂犬病毒的核酸組合、試劑盒及應用，屬于動物檢驗檢疫領域。本發明提供的檢測偽狂犬病毒的核酸組合包括引物對和探針，其堿基序列如SEQ ID NO.1?3所示，該核酸組合能特異的識別偽狂犬病毒的特異序列，具有較好的特異性；而由于探針的應用，使檢測具有更高的靈敏度；在制備檢測偽狂犬病毒的試劑盒，應用上述核酸組合，使檢測偽狂犬病毒更為快速準確，具有更高的特異性和靈敏度，而且更有利于臨床推廣和使用。

技術領域

本發明涉及動物檢驗檢疫領域，且特別涉及一種檢測偽狂犬病毒的核酸組合、試劑盒及應用。

背景技術

豬偽狂犬病(Pseudorabies，PR)是一種對畜牧業危害極大的傳染病，由偽狂犬病病毒(Pseudorabies Virus，PRV)引起，可感染多種家畜及野生動物，臨床上主要表現為發熱、奇癢(豬除外)、繁殖障礙和腦脊髓炎，具有傳播范圍廣、傳播途徑多、發病快、死亡率高、病原體頑固等特點。目前該病已呈世界性分布，而且流行愈來愈嚴重，給全球養豬業造成巨大的經濟損失。因此建立一種能夠快速、敏感和特異的檢測PRV的方法對該病的控制至關重要。

PRV的檢測方法目前主要有動物接種、病毒的分離與鑒定、血清學檢測方法和分子生物學檢測方法。前三種方法雖然具有特異性和敏感性，但對技術條件要求高，操作比較繁瑣，檢測周期長，因此不利于病毒的快速檢測。分子生物學檢測方法，檢測的是核酸，是敏感性最高的一種檢測方法，以其檢測快度、靈敏度高、特異性好等特點被廣泛應用于臨床檢測。分子生物學檢測方法主要包括常規PCR法和實時熒光定量PCR法(FQ-PCR)。

傳統PCR方法雖然檢測簡單、快速、方便但存在靈敏度和特異性不夠。

發明內容

本發明的目的在于提供一種檢測偽狂犬病毒的核酸組合，引物組合包含引物對和探針，引物對和探針能特異的結合到目標條帶，靈敏度也比較高；而且通過探針標記的顯色基團能快速反應出檢測結果。

本發明的第二目的在于提供上述的檢測偽狂犬病毒的核酸組合在檢測偽狂犬病毒中的應用。

本發明的第三目的在于提供上述的檢測偽狂犬病毒的核酸組合在制備檢測偽狂犬病毒試劑盒中的應用。

本發明的第四目的在于提供一種檢測偽狂犬病毒的試劑盒，該試劑盒包括上述核酸組合，組成簡單，適用于快速檢測偽狂犬病毒，而且成本低廉，便于應用和推廣。

本發明解決其技術問題是采用以下技術方案來實現的。

一種檢測偽狂犬病毒的核酸組合，核酸組合包括引物對和探針，引物對的堿基序列如SEQ ID NO.1-2所示，探針的堿基序列如SEQ ID NO.3所示，探針的5’端標記第一顯色基團和探針的3’端標記有第二顯色基團。

第一顯色基團為異硫氰酸熒光素FITC、6-羧基熒光素6-FAM和生物素Biotin中的一種；第二顯色基團為異硫氰酸熒光素FITC、6-羧基熒光素6-FAM和生物素Biotin中的一種；第一顯色基團不同于第二顯色基團。

上述核酸組合在檢測偽狂犬病毒中的應用。

上述的檢測偽狂犬病毒的核酸組合在制備檢測偽狂犬病毒試劑盒中的應用。

一種檢測偽狂犬病毒的試劑盒，包括上述的核酸組合。

與現有技術相比，本發明的有益效果是：針對偽狂犬病毒特異序列設計的核酸組合包括引物對及探針，具有很高的特異性，因此在樣本量較低的情況下，也能檢測到樣本，所以該核酸組合具有很高的靈敏度；能準確的檢測到偽狂犬病毒；檢測偽狂犬病毒的試劑盒，包含上述核酸組合，由于上述核酸組合的應用，使檢測更為方便快捷，結果更為準確，而且試劑盒成本低廉，具有更廣泛的應用。

附圖說明