[發明專利]一種采用分光光度法測定蝦青素的含量的方法

在審

• 申請號: 201611159277.4
• 申請日: 2016-12-15
• 公開（公告）號: CN108226061A
• 公開（公告）日: 2018-06-29
• 發明（設計）人: 洪霞;杜霞;張淑雅
• 申請（專利權）人: 鎮江億特生物科技發展有限公司
• 主分類號: G01N21/31
• 分類號: G01N21/31
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明公開了一種分光光度法測定蝦青素的含量的方法，結果顯示，采用經氫醌處理的三氯甲烷做為提取溶液，在489 nm 波長下測定吸光度，該分光光度法的標準曲線回歸系數是0.9999，相對標準偏差為 0.36%，加標回收率99.8%~102.5%，表明該分析方法準確性高、重復性好，且簡便、快速，可以作為企業大批量生產中蝦青素的測定方法。

技術領域

本發明屬于飼料添加劑檢驗領域。具體涉及蝦青素含量的測定方法。

背景技術

蝦青素是一種廣泛存在于生物體的非維生素A 源類胡蘿卜素。在水生動物蝦、

蟹、魚和鳥類的羽毛中發揮調節色素沉積并顯色的作用。蝦青素被廣泛應用于魚蝦等水產養殖動物的飼料添加劑，以補充人體內蝦青素的缺乏。蝦青素是類胡蘿卜素合成的最高級別產物，具有明顯的抗氧化、消除活性單線態氧的作用。 因此在食品、化妝品、保健品領域也有著廣泛的應用前景。

從動植物及菌類中提取的蝦青素，由于其蝦青素含量較低及檢測限值低的原因，

基本采用液相色譜分析法。 而目前市場上魚飼料中的蝦青素90%是化學合成得到， 國內尚未見有系統的對化工合成的蝦青素含量檢測的研究報道。 本文研究

參考國外對蝦青素理化性質的報道，采用紫外分光光度法對化學合成蝦青素的含量進行檢測，結果滿意可行。

發明內容

本文采用分光光度法測定蝦青素的含量的方法，與離子色譜法相比，其操作簡捷且結果準確，儀器易普及，適合在各飼料企業推廣使用。

本發明包括以下步驟：

（1）樣品預處理

準確稱取蝦青素樣品40mg（準確至0.0002 g），置于250mL的棕色容量瓶，加入10mgBHT，加入50mL二氯甲烷溶解，在熱水浴中超聲5min，流水冷卻至室溫； 再加入100mL三氯甲烷繼續超聲5min 溶解，冷卻至室溫，然后用三氯甲烷稀釋至刻度，搖勻，即為待測溶液。準確移取待測溶液A 1.0mL于50mL 棕色容量瓶中，用處理過的三氯甲烷（三氯甲烷加0.02%氫醌振搖后過濾）稀釋至刻度，搖勻得溶液B。準確移取試驗溶液 1.0mL于50mL棕色容量瓶中，用處理后的三氯甲烷稀釋至刻度，搖勻。

（2）樣品測定

用紫外—可見光分光光度計測定溶液 B 在波長489nm 處的吸光度（1 cm石英比色皿）。以處理后的三氯甲烷為空白對照。

計算：

式中：x——樣品中蝦青素百分含量；A₄₈₉——樣品溶液在 489 nm 處測得的吸光度；M——稱取樣品的質量，g；12500——樣品的稀釋倍數；1975——蝦青素的百分吸收系數（E_1cm=1%）。

附圖說明

圖1 分光光度法的蝦青素標準。

圖2 蝦青素標準溶液的吸收光譜圖（三氯甲烷）。

具體實施方式

下面將詳細說明本發明的具體實施方式：

1.儀器與試劑：

儀器：

UV8500雙光束 紫外分光光度計（無錫科達儀器廠）；電子天平（賽多利斯科學儀器（北京）有限公司）；超聲波清洗器（杭州科博儀器有限公司）；恒溫水浴裝置（金壇市科析儀器有限公司）；離心機；氮氣吹干；石英比色皿。

試劑：