[發明專利]經遺傳修飾的動物及其生成方法

有效

• 申請號: 201611151706.3
• 申請日: 2012-02-24
• 公開（公告）號: CN107090470B
• 公開（公告）日: 2021-09-07
• 發明（設計）人: S.C.法倫克魯格;D.F.卡爾森;S.G.利利科;C.J.帕爾格雷夫;C.B.A.懷特洛
• 申請（專利權）人: 重組股份有限公司;愛丁堡大學理事會
• 主分類號: C12N15/85
• 分類號: C12N15/85;A01K67/027;C12N15/90;C12N5/10
• 代理公司: 北京市柳沈律師事務所 11105
• 代理人: 張文輝

1.一種產生經遺傳修飾的家畜動物細胞的方法，所述細胞包含選自下組的遺傳修飾：插入、缺失、外源核酸片段的插入、倒位、基因轉化成天然等位基因、基因轉化成合成等位基因、和基因轉化成新等位基因，其中所述動物細胞沒有外源報告物基因，所述方法包括向所述家畜動物細胞引入編碼核酸酶的核酸和外源核酸的步驟，所述外源核酸用作同源性依賴性修復(HDR)模板并且包含所述遺傳修飾；

其中所述經遺傳修飾的家畜動物細胞包含外源核酸片段。

2.權利要求1的方法，其中所述家畜動物選自下組：牛、豬、綿羊、山羊、兔、家禽和魚。

3.權利要求1的方法，其中所述遺傳修飾包含缺失，該缺失包括500個堿基對的缺失。

4.權利要求1的方法，其中所述遺傳修飾包含缺失，所述缺失包含兆堿基對的缺失。

5.權利要求1的方法，其中所述遺傳修飾包含倒位，該倒位包含兆堿基的染色體DNA。

6.權利要求1的方法，其中所述遺傳修飾包含倒位，該倒位包含500個堿基對。

7.權利要求1的方法，其中所述遺傳修飾包含倒位，其中所述倒位編碼遺傳性狀。

8.權利要求1的方法，其中所述細胞包含來自不是Belgian Blue牛的牛系動物的細胞，其中所述遺傳修飾包含Belgian Blue牛中流行的肌肉生長抑制素缺失。

9.權利要求1的方法，其中所述細胞是祖細胞、成年或胚胎干細胞、腎細胞、胰島細胞、beta細胞、肝細胞、或成纖維細胞。

10.權利要求1的方法，其中所述細胞是PK-15細胞或皮膚成纖維細胞。

11.一種產生經遺傳修飾的家畜動物細胞的方法，所述細胞包含：

來自家畜動物的第一品種的細胞，其包含來自家畜動物的第二品種的等位基因，

所述方法包括向所述第一品種的家畜動物細胞引入編碼核酸酶的核酸和外源核酸的步驟，所述外源核酸用作同源性依賴性修復(HDR)模板并且包含所述來自家畜動物的第二品種的等位基因；

其中所述經遺傳修飾的家畜動物細胞包含插入的外源核酸片段；

其中所述來自家畜動物的第一品種的細胞沒有與動物的第二品種的減數分裂重組。

12.權利要求11的方法，其中所述動物選自下組：豬、牛、綿羊、山羊、雞、兔和魚。

13.權利要求11的方法，其中所述第一品種是Wagyu牛，且所述第二品種是BelgianBlue牛。

14.權利要求11的方法，其中所述等位基因選自下組：插入、缺失、大小多態性、和單核苷酸多態性。

15.權利要求11的方法，其中所述動物細胞沒有外源標志物基因。

16.權利要求11的方法，其中所述動物細胞包含多個所述等位基因。

17.權利要求11的方法，其中所述等位基因與所述第二品種的數量性狀或質量性狀有聯系。

18.權利要求11的方法，其中所述細胞是祖細胞、成年或胚胎干細胞、腎細胞、胰島細胞、beta細胞、肝細胞、或成纖維細胞。

19.權利要求11的方法，其中所述細胞是PK-15細胞或皮膚成纖維細胞。