[發明專利]間歇浸沒式荔浦芋組培苗快速增殖的方法及荔浦芋種苗有效
| 申請號： | 201611150493.2 | 申請日： | 2016-12-14 |
| 公開（公告）號： | CN106718902B | 公開（公告）日： | 2021-01-26 |
| 發明（設計）人： | 董偉清;何芳練;顏梅新;江文;韋紹龍;楊柳;胡祥紅;邱祖楊;高美萍;何青石;周運貴;楊盈歡 | 申請（專利權）人： | 廣西壯族自治區農業科學院 |
| 主分類號： | A01H4/00 | 分類號： | A01H4/00 |
| 代理公司： | 北京超凡志成知識產權代理事務所(普通合伙) 11371 | 代理人： | 王闖 |
| 地址： | 530007 廣西*** | 國省代碼： | 廣西;45 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 間歇 浸沒 荔浦 芋組培苗 快速 增殖 方法 種苗 | ||
1.間歇浸沒式荔浦芋組培苗快速增殖的方法，其特征在于，所述方法包括如下步驟：
（1）建立間歇浸沒液體培養系統：分別配置繼代增殖液體培養基和生根液體培養基，并將所配置的培養基和間歇浸沒式生物反應器滅菌后備用；
所述間歇浸沒式生物反應器的主要結構包括：培養瓶、儲液瓶、蠕動泵，儲液瓶通過硅膠軟管與培養瓶連接，通過蠕動泵的作用將液體培養基從儲液瓶抽到培養瓶，再從培養瓶抽回儲液瓶；所述培養瓶包括容器主體以及密封蓋體，所述密封蓋體頂部設有兩個軟管通孔，所述培養瓶和儲液瓶為容積3L，儲液瓶中液體培養基體積為1L；
所述繼代增殖液體培養基為添加有6-BA、NAA、PP333以及白砂糖的基礎MS培養基；
其中，6-BA的濃度為4mg/L，NAA的濃度為0.05mg/L，PP333的濃度為0.2mg/L,白砂糖的濃度為30g/L；
所述生根液體培養基為添加有NAA、IBA、PP333以及白砂糖的基礎MS培養基；
其中NAA的濃度為0.3mg/L，IBA的濃度為0.4mg/L，PP333的濃度為0.4mg/L,白砂糖的濃度為30g/L；
（2）接種與繼代增殖培養：制備荔浦芋外植體，并將荔浦芋外植體接種于間歇浸沒式生物反應器中，并在繼代增殖液體培養基中進行繼代增殖培養；
其中，荔浦芋外植體制備方法如下：取荔浦芋莖尖分生組織培養的第4代組培苗，并將誘導出的不定芽切為單芽或雙芽，剝離老葉，并保留芽體1～2cm，即得；
荔浦芋外植體的接種密度為：每升培養液中接種10～15株外植體；
繼代培養條件為：溫度28±1℃，光照1500Lx，12小時光照，12小時黑暗，設定間歇浸沒式生物反應器的相關參數，即間歇培養的間歇頻率為每4小時一次，培養時間為5分鐘，培養時間30天；
（3）生根培養：繼代增殖培養結束后，將間歇浸沒式生物反應器中的培養基替換為生根液體培養基，并繼續進行生根培養；
生根培養條件為：溫度28±1℃，光照1500Lx，14小時光照，10小時黑暗，設定間歇浸沒式生物反應器的相關參數，即間歇培養的間歇頻率為每6小時一次，培養時間為3分鐘，培養時間20天；
（4）生根苗移栽：生根培養結束后，將所得組培生根苗移栽至培養杯中育苗，并將所得種苗移栽至田地。
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