[發明專利]一種測定大豆肽蛋白質粉中β-羥基-β-甲基丁酸含量的方法

有效

• 申請號: 201611149150.4
• 申請日: 2016-12-14
• 公開（公告）號: CN106596771B
• 公開（公告）日: 2019-03-29
• 發明（設計）人: 王小妹;溫愷嘉;李益;羅明琍;梁北梅;曾榮華
• 申請（專利權）人: 廣州白云山漢方現代藥業有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 廣州市深研專利事務所 44229
• 代理人: 姜若天

1.一種高效液相色譜外標法測定大豆肽蛋白質粉中β-羥基-β-甲基丁酸含量的方法，其特征在于包括如下步驟：

（1）樣品溶液的制備：取樣品0.6g，精密稱定，置25ml量瓶中，加入0.1mol/L的鹽酸溶液5ml，用力振搖使固體溶解，以乙腈稀釋至刻度，振搖1分鐘，濾過，精密吸取續濾液2.0ml置5ml量瓶中，以0.1mol/L的鹽酸溶液稀釋至刻度，搖勻，經0.45μm濾膜濾過，取續濾液，作為樣品溶液；

（2）對照品溶液的制備：取β-羥基-β-甲基丁酸鈣水合物對照品適量，加0.1mol/L的鹽酸溶液溶解并稀釋，制成每ml含β-羥基-β-甲基丁酸為0.1mg、0.3mg、0.5mg、0.7mg、1.0mg的對照品溶液；

（3）β-羥基-β-甲基丁酸含量測定方法：

色譜條件：色譜柱為十八烷基硅烷硅膠為填充劑，以0.01mol/L庚烷磺酸鈉溶液-乙腈為流動相，柱溫為35℃，流速為0.4~0.6ml/min，樣品進樣量：5μl，檢測波長為214nm；

測定法：精密量取對照品溶液1~5各5μl，注入液相色譜儀，按濃度對峰面積繪制標準曲線計算回歸方程；另精密量取樣品溶液5μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖，用回歸方程計算樣品中β-羥基-β-甲基丁酸的含量；

所述步驟（3）的液相色譜條件中色譜柱為PhenomexUranus C18，5μm，長度：250×4.6mm；

所述步驟（3）的液相色譜條件中流動相為0.01mol/L庚烷磺酸鈉溶液-乙腈，兩者的體積比為93～97：7～3；

所述步驟（3）的液相色譜條件中流動相流速：0.5ml/min；

所述步驟（3）的液相色譜條件中，流動相用10%磷酸溶液調節pH值為2.8 ~3.2。