[發(fā)明專(zhuān)利]一種抗草甘膦玉米品種鑒定方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201611147471.0
• 申請(qǐng)日: 2016-12-13
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN106576829A
• 公開(kāi)（公告）日: 2017-04-26
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 燕樹(shù)鋒;鐵雙貴;劉海芳;孫書(shū)庫(kù);齊建雙;岳潤(rùn)清;盧彩霞;韓小花;郭書(shū)磊
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 河南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院;河南農(nóng)業(yè)大學(xué)
• 主分類(lèi)號(hào): A01G1/00
• 分類(lèi)號(hào): A01G1/00;A01C1/00
• 代理公司: 鄭州聯(lián)科專(zhuān)利事務(wù)所(普通合伙)41104
• 代理人: 時(shí)立新

技術(shù)領(lǐng)域

本申請(qǐng)屬于農(nóng)業(yè)品種鑒定技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種抗草甘膦玉米品種鑒定方法的專(zhuān)利申請(qǐng)。

背景技術(shù)

近年來(lái)，中國(guó)玉米年種植面積超過(guò)了5.5億畝，為我國(guó)第一大糧食作物。雜草是玉米生產(chǎn)過(guò)程中的主要危害之一，每年造成的損失約為總產(chǎn)量的10%。人工除草由于不能適應(yīng)現(xiàn)代農(nóng)業(yè)生產(chǎn)需求，已基本上被化學(xué)除草等方式替代。草甘膦與其他除草劑相比，具有價(jià)格低、高效、廣譜、低毒、無(wú)殘留等特點(diǎn)，且抗性雜草常年保持在相對(duì)較低的水平，所以已連續(xù)多年排行世界農(nóng)藥銷(xiāo)售額首位。

草甘膦為滅生性除草劑，對(duì)植物無(wú)選擇性，只能適應(yīng)播前或荒地等除草，因此通過(guò)基因工程等手段，培育出抗草甘膦的作物是其擴(kuò)大應(yīng)用的先決條件。1996~2015年間，轉(zhuǎn)基因作物種植面積擴(kuò)大了100多倍，其中轉(zhuǎn)基因玉米累計(jì)種植面積達(dá)到了90億畝。目前，得到商業(yè)化應(yīng)用的抗草甘膦轉(zhuǎn)基因玉米主要有孟山都公司的GA21、MON801、MON802、MON809、MON832、MON87427、NK603、MON88017和先鋒公司的98140等。國(guó)內(nèi)轉(zhuǎn)基因抗草甘膦玉米尚未商業(yè)化應(yīng)用，研發(fā)和安評(píng)申請(qǐng)較為領(lǐng)先的玉米品種有浙江大學(xué)的雙抗12-5、中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)的CC-2、大北農(nóng)公司的C0030.3.5和奧瑞金公司轉(zhuǎn)mG2-aroA基因的抗草甘膦玉米等。此外，趙錦慧等（應(yīng)用誘變法篩選玉米抗草甘膦突變株系的研究，河南農(nóng)業(yè)科學(xué)，2011,，40(4): 49-52）2011年報(bào)道了通過(guò)誘變法獲得了2株抗草甘膦玉米和通過(guò)體細(xì)胞篩選法獲得抗草甘膦玉米突變體，但迄今為止未見(jiàn)相關(guān)后續(xù)報(bào)道。

現(xiàn)有技術(shù)中，針對(duì)草甘膦抗性玉米品種鑒定，主要采用室外噴施草甘膦除草劑（農(nóng)達(dá)）進(jìn)行抗草甘膦玉米抗性鑒定方法進(jìn)行，其主要操作方法為：在合適的氣候條件下，在玉米長(zhǎng)到4~6葉期后噴施草甘膦，噴完藥后1周左右進(jìn)行鑒定。這種鑒定方法具有比較明顯的占用空間大、操作時(shí)間長(zhǎng)、應(yīng)用環(huán)境較為受限等缺陷，加上草甘膦藥效容易受到噴藥時(shí)溫度、光照、降水等天氣因素的自然影響，因而導(dǎo)致該方法的鑒定結(jié)果不夠穩(wěn)定，應(yīng)用條件較為受限。因此，探討一種易于操作的、快速高效的草甘膦抗性玉米品種鑒定方法，對(duì)于玉米品種篩選、品種推廣具有十分重要的意義。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明目的在于提供一種操作較為簡(jiǎn)便的、草甘膦抗性玉米品種的鑒定方法，從而為玉米品種篩選和培育奠定一定的應(yīng)用基礎(chǔ)。

本申請(qǐng)的技術(shù)方案詳述如下。

一種抗草甘膦玉米品種鑒定方法，具體包括如下步驟：

（1）將待檢玉米種子置于草甘膦質(zhì)量濃度為0.1~2.0%的清水溶液中進(jìn)行浸種，室溫（18~25℃）條件下，浸泡8~24h；

優(yōu)選草甘膦濃度不低于0.5%；

同時(shí)設(shè)置清水對(duì)照；

（2）將步驟（1）中浸種后玉米種子25~28℃、16 h光/8 h暗條件下進(jìn)行培養(yǎng)；

培養(yǎng)時(shí)，玉米種子可置于營(yíng)養(yǎng)缽中、沙盤(pán)中或擺放于鋪有濾紙的培養(yǎng)皿中進(jìn)行培育，營(yíng)養(yǎng)缽中，營(yíng)養(yǎng)土與蛭石按1:1混勻；濾紙用清水浸濕；

（3）對(duì)步驟（2）中玉米種子的出苗率、幼苗全株鮮重、根長(zhǎng)、莖長(zhǎng)、葉重和葉片葉綠素含量等形態(tài)指標(biāo)與生理指標(biāo)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，

在步驟（2）的玉米種子培養(yǎng)6d后，再對(duì)出苗率進(jìn)行統(tǒng)計(jì)；

在步驟（2）的玉米種子培養(yǎng)7d后，再對(duì)幼苗全株鮮重和葉重進(jìn)行稱(chēng)量、統(tǒng)計(jì)；

在步驟（2）的玉米種子培養(yǎng)7d后，再對(duì)幼苗根長(zhǎng)和莖長(zhǎng)分別進(jìn)行測(cè)量；

在步驟（2）的玉米種子培養(yǎng)7d后，再對(duì)幼苗葉片葉綠素含量進(jìn)行測(cè)定；

并與清水對(duì)照組進(jìn)行對(duì)比，如果各項(xiàng)指標(biāo)均未發(fā)生顯著變化，則可認(rèn)為待檢玉米種子為抗草甘膦玉米品種。

所述抗草甘膦玉米品種鑒定方法，檢測(cè)過(guò)程中，優(yōu)選單獨(dú)或者同時(shí)加入待檢玉米品種的遺傳背景親本和非抗草甘膦玉米品種作為對(duì)照組；所述非抗草甘膦玉米品種具體例如為雜交種鄭單1002；在浸種液中草甘膦濃度不小于0.5 %時(shí)，鄭單1002種子不能發(fā)芽。

所述抗草甘膦玉米品種鑒定方法，所述待檢玉米品種，具體例如對(duì)抗草甘膦玉米CC-2品種的檢測(cè)，對(duì)應(yīng)的，抗草甘膦玉米CC-2品種的背景親本為鄭58；鄭58為非抗草甘膦品種，與抗草甘膦玉米CC-2品種基因組相比，其缺少抗草甘膦基因，在浸種液中草甘膦濃度不小于0.1 %時(shí)，鄭58種子發(fā)芽率顯著降低，即使發(fā)芽種子也全部表現(xiàn)為明顯草甘膦危害的癥狀。