[發明專利]一種細菌浸出液中屏蔽蛋白質提高電極測砷靈敏度的方法

有效

• 申請號: 201611138414.6
• 申請日: 2016-12-12
• 公開（公告）號: CN106770468B
• 公開（公告）日: 2019-05-21
• 發明（設計）人: 楊洪英;宋言;佟琳琳;金哲男;劉子龍;李王強;張勤;肖發新
• 申請（專利權）人: 東北大學
• 主分類號: G01N27/00
• 分類號: G01N27/00
• 代理公司: 沈陽東大知識產權代理有限公司 21109
• 代理人: 趙嬛嬛

本發明提供一種細菌浸出液中屏蔽蛋白質提高電極測砷靈敏度的方法，包括以下步驟：將待測細菌浸出液和濃硫酸和硫酸銅溶液混合均勻，加入硫酸肼，于200~350℃下加熱1.0~2.0h，進行蛋白質屏蔽；將屏蔽蛋白質的待測細菌混合液冷卻至室溫，加入去離子水煮沸；將煮沸的細菌混合液采用碘離子電極測定混合液中的總砷含量。本發明可以有效屏蔽細菌浸出液中的高濃度蛋白質，可屏蔽的蛋白質最高濃度為0.6432g·L^?1，可以大大提高碘離子電極測定總砷含量的靈敏度。

技術領域

本發明屬于生物冶金技術領域，具體涉及一種細菌浸出液中屏蔽蛋白質提高電極測砷靈敏度的方法。

背景技術

細菌氧化預處理過程中伴隨著含砷礦物的浸出，細菌浸出液中砷的積累會影響細菌氧化預處理的效果。因此，及時檢測細菌浸出液中的砷含量對實際生產具有極其重要的意義。然而，細菌浸出液中蛋白質濃度很高，采用常規的碘離子電極測砷法，無法獲得精準的數據。一方面，高濃度蛋白質在溶液中極易形成膠體對砷離子產生吸附作用進而影響總砷含量的測定；另一方面，細菌浸出液中含有大量抗砷蛋白會與砷離子結合進而影響總砷含量的測定。碘離子電極測砷法是一種常用的測砷方法，但當溶液中含有高濃度蛋白質時，離子電極測砷法往往不準確，大大降低了該方法測定的靈敏度。因此，如何屏蔽細菌浸出液中的高濃度蛋白質，克服其在測砷時的干擾、獲得精準的數據已經成為提高碘離子電極測定總砷含量靈敏度的關鍵問題，對生產實踐具有極其重要的意義。

發明內容

針對現有技術存在的問題，本發明提供一種細菌浸出液中屏蔽蛋白質提高電極測砷靈敏度的方法。本發明采用的技術方案為：

一種細菌浸出液中屏蔽蛋白質提高電極測砷靈敏度的方法，包括以下步驟：

將待測細菌浸出液和濃硫酸和硫酸銅溶液混合均勻，加入硫酸肼，于200~350℃下加熱1.0~2.0h，進行蛋白質屏蔽；

將屏蔽蛋白質的待測細菌混合液冷卻至室溫，加入去離子水煮沸；

將煮沸的細菌混合液采用碘離子電極測定混合液中的總砷含量。

上述方法中，所述濃硫酸的用量為3~5mL/mL待測細菌浸出液；所述硫酸銅溶液的質量濃度為5%，用量為0.1~0.25mL/mL待測細菌浸出液；所述硫酸肼的用量為0.1~0.5g/mL待測細菌浸出液。

上述方法中，所述煮沸的細菌混合液的蛋白質濃度在3.2×10^-5 g·L^-1以下。

上述方法中，所述將煮沸的細菌混合液采用碘離子電極測定混合液中的總砷含量，具體方法為：取若干容量瓶，每個容量瓶中加入1mol·L^-1的KNO₃ 溶液2~5mL、0.5mol·L^-1的C₂H₃ClO₂ 溶液0.5~1.0mL、和不同體積的砷標準溶液，定容；將定容后的每份含砷溶液中滴加0.05mol·L^-1的碘-乙醇溶液至微黃色，測定系列含砷溶液的電位值；以電位值為縱坐標，以含砷溶液中砷濃度梯度的負對數為橫坐標，繪制標準工作曲線；將1mL煮沸的細菌混合液溶液中加入1mol·L^-1的KNO₃ 溶液2~5mL、0.5mol·L^-1的C₂H₃ClO₂ 溶液0.5~1.0mL，定容后調節pH至1.60~10.0，滴加0.05mol·L^-1的碘-乙醇溶液至微黃色后測定其電位值，利用標準工作曲線及稀釋倍率計算得到細菌浸出液中的總砷含量。

所述方法可屏蔽的蛋白質最高濃度為0.6432g·L^-1。