[發(fā)明專利]一種細(xì)胞內(nèi)Hg2+的熒光成像方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201611127907.X
• 申請(qǐng)日: 2017-04-14
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN107064080B
• 公開(kāi)（公告）日: 2019-10-22
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王衛(wèi);董穎杰;羅細(xì)亮;樊瀟健;張召香;孫雪梅
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 青島科技大學(xué)
• 主分類號(hào): G01N21/64
• 分類號(hào): G01N21/64;G01N33/52
• 代理公司: 青島中天匯智知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 37241
• 代理人: 郝團(tuán)代

1.一種細(xì)胞內(nèi)Hg²⁺的熒光成像方法，其特征在于：該方法采用了一種基于可控釋放的生物傳感器，所述的生物傳感器是由金納米籠、熒光分子和Hg²⁺識(shí)別探針構(gòu)建而成，所述的Hg²⁺識(shí)別探針是堿基序列為3’-TTT GTT TGT TGG CCC CCC TTC TTT CTT A-5’的富含T堿基的單鏈DNA，它與Hg²⁺能夠發(fā)生特異性的分子識(shí)別反應(yīng)。

2.一種如權(quán)利要求1所述的Hg²⁺的熒光成像方法，其特征在于：所述的Hg²⁺識(shí)別探針是通過(guò)靜電作用被組裝到金納米籠表面。

3.一種如權(quán)利要求1所述的Hg²⁺的熒光成像方法，其特征在于：所述的熒光分子是羅丹明B。

4.一種如權(quán)利要求1所述的細(xì)胞內(nèi)Hg²⁺的熒光成像方法，其特征在于步驟如下：

（1）取適量細(xì)胞懸浮液，離心分離，移除上清液；

（2）加入所述的生物傳感器進(jìn)行孵育，10-50 min后進(jìn)行激光共聚焦掃描成像；

其中，所述的生物傳感器的制備方法，步驟如下：

(1)金納米籠中加入聚二烯丙基二甲基氯化銨溶液，室溫振蕩過(guò)夜；

(2)加入羅丹明B溶液，室溫振蕩過(guò)夜；

(3)向上述溶液中加入富T單鏈DNA溶液，室溫振蕩過(guò)夜，離心分離，用緩沖溶液清洗后即制得生物傳感器。