[發明專利]一種誘導西藏綿頭雪蓮愈傷組織產生花青素的方法有效
| 申請號： | 201611127132.6 | 申請日： | 2016-12-09 |
| 公開（公告）號： | CN106577279B | 公開（公告）日： | 2018-08-24 |
| 發明（設計）人： | 陳玉珍;盧存福 | 申請（專利權）人： | 北京林業大學 |
| 主分類號： | A01H4/00 | 分類號： | A01H4/00 |
| 代理公司： | 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245 | 代理人： | 關暢;白艷 |
| 地址： | 100083 *** | 國省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 誘導 西藏 雪蓮 組織 產生 花青素 方法 | ||
1.一種雪蓮愈傷組織細胞系的制備方法，包括如下步驟：
(1)將雪蓮的外植體在愈傷組織誘導培養基上進行誘導培養，得到愈傷組織；
(2)將所述愈傷組織在愈傷組織繼代培養基上進行繼代培養，得到雪蓮愈傷組織細胞系；
所述雪蓮為西藏綿頭雪蓮；
所述愈傷組織誘導培養基和所述愈傷組織繼代培養基中的溶質均包括6-BA和NAA；
所述6-BA在所述愈傷組織誘導培養基中的濃度為1-1.5mg/L；
所述NAA在所述愈傷組織誘導培養基中的濃度為1.5-2mg/L；
所述6-BA在所述愈傷組織繼代培養基中的濃度為0.5-1.0mg/L；
所述NAA在所述愈傷組織繼代培養基中的濃度為1.5-2mg/L；
所述繼代培養的方法為將所述愈傷組織在培養溫度不斷提高的條件下進行溫度梯度馴化培養，所述溫度梯度為22℃、24℃、26℃、28℃和30℃，每個溫度培養3年。
2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：
所述愈傷組織誘導培養基和所述愈傷組織繼代培養基均是將基礎培養基、6-BA、NAA、蔗糖、凝固劑和水混勻得到的培養基；
所述凝固劑為瓊脂；
所述蔗糖在愈傷組織誘導培養基和所述愈傷組織繼代培養基中的濃度均為25-30g/L；
所述瓊脂在愈傷組織誘導培養基和所述愈傷組織繼代培養基中的濃度均為6.5-7.0g/L。
3.根據權利要求2所述的方法，其特征在于：
所述6-BA在所述愈傷組織誘導培養基中的濃度為1mg/L；
所述NAA在所述愈傷組織誘導培養基中的濃度為1.5mg/L；
所述6-BA在所述愈傷組織繼代培養基中的濃度為0.5mg/L；
所述NAA在所述愈傷組織繼代培養基中的濃度為1.5mg/L；
所述蔗糖在愈傷組織誘導培養基和所述愈傷組織繼代培養基中的濃度均為30g/L；
所述瓊脂在愈傷組織誘導培養基和所述愈傷組織繼代培養基中的濃度均為6.5g/L。
4.根據權利要求1-3中任一所述的方法，其特征在于：
所述培養基的pH均為5.7-5.9；
所述誘導培養的條件為：21-23℃、黑暗；
所述繼代培養的條件為：避光。
5.根據權利要求1-3中任一所述的方法，其特征在于：所述雪蓮的外植體為雪蓮的根、莖或葉片。
6.一種產生花青素的方法，包括誘導培養利用權利要求1-5任一所述方法制備獲得的細胞系的步驟；所述誘導培養的條件為低溫、黑暗；
所述低溫為4℃。
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