[發(fā)明專利]一種高粘附益生性屎腸球菌及其應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201611125252.2
• 申請日: 2016-12-08
• 公開（公告）號: CN108179122B
• 公開（公告）日: 2021-02-02
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張炳坤;劉璇;咼于明
• 申請（專利權(quán)）人: 中國農(nóng)業(yè)大學(xué)
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A23K10/18;A61K35/744;A61P1/14;A61P37/04;C12R1/46
• 代理公司: 北京路浩知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11002
• 代理人: 王文君

本發(fā)明公開了一種高粘附益生性屎腸球菌(Enterococcus faecium)及其應(yīng)用，該屎腸球菌的保藏編號為CGMCC NO.13229。本發(fā)明的屎腸球菌具有具有較強(qiáng)的抗逆性，能夠耐高溫、耐酸、黏附性能好，還具有優(yōu)良的益生性，能夠提高飼料利用率，促進(jìn)飼料中營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收，促進(jìn)動(dòng)物生長；增強(qiáng)動(dòng)物的免疫功能，提高日增重，降低料肉比；具有無污染，無殘留，生物環(huán)保等特點(diǎn)。本發(fā)明的屎腸球菌可作為一種新型的益生菌添加劑，廣泛應(yīng)用于飼料中。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于微生物應(yīng)用技術(shù)領(lǐng)域，具體地說，涉及一種高粘附益生性屎腸球菌及其應(yīng)用。

背景技術(shù)

在養(yǎng)殖業(yè)中動(dòng)物發(fā)生疾病會造成很大的經(jīng)濟(jì)損失，如腸炎、腹瀉等，很多都是由病原菌引起的，并且對于人類的健康也造成著一定的威脅。隨著抗生素的發(fā)現(xiàn)使這一狀況得以改善，抗生素可以在短時(shí)間內(nèi)殺死致病菌，能有效地治療細(xì)菌性疾病，并且抗生素還能促進(jìn)動(dòng)物的生長。所以抗生素可以用于治療和預(yù)防一些疾病，還可以用作促生長劑。但是隨著科學(xué)的進(jìn)步，抗生素的弊端也漸漸被人們發(fā)現(xiàn)。

隨著人們對畜產(chǎn)品安全和環(huán)境保護(hù)意識的不斷加強(qiáng)，作為抗生素的替代品，益生菌越來越多的應(yīng)用于動(dòng)物營養(yǎng)和飼料中。益生菌是一類能改善動(dòng)物胃腸道微生態(tài)平衡，有益于動(dòng)物健康和生產(chǎn)性能發(fā)揮的微生物添加劑。其主要作用效果體現(xiàn)在改善動(dòng)物新陳代謝，提高營養(yǎng)物質(zhì)吸收和利用，提高免疫力，減少環(huán)境污染等方面發(fā)揮重要作用。益生菌被允許使用于飼料添加利，能通過黏附機(jī)制和競爭性抑制等作用阻止腸道中的有害微生物的生長繁殖，并且其代謝產(chǎn)物能殺死病原菌，具備維持動(dòng)物腸道微生物的穩(wěn)態(tài)、促進(jìn)動(dòng)物的生長、預(yù)防和治療疾病等功效，并能降低動(dòng)物的死亡率。其不僅解決了抗生素對腸道內(nèi)正常微生物的不良影響的問題，還能避免使用抗生素而產(chǎn)生副作用以及抗藥性等等。

屎腸球菌(Enterococcus faecium)是動(dòng)物腸道正常乳酸菌類，革蘭氏陽性，兼性厭氧，無芽孢和鞭毛的橢球形或球形菌。生長溫度為30～40℃，最適溫度為35～38℃，適宜的pH為5.0～7.5，抗逆性較差，代謝產(chǎn)生大量乳酸。研究發(fā)現(xiàn)屎腸球菌能夠增強(qiáng)仔豬的免疫系統(tǒng)功能，并改善腸道菌群結(jié)構(gòu)從而促進(jìn)斷奶仔豬的生長，可以降低肉雞盲腸大腸桿菌數(shù)量增加乳酸桿菌的數(shù)量，并使腸道菌群處于穩(wěn)定的狀態(tài)，還能提高產(chǎn)蛋后期的產(chǎn)蛋率、產(chǎn)蛋數(shù)量以及蛋重。屎腸球菌對免疫器官、腸道絨毛發(fā)育、腸道微生物的數(shù)量和多樣性產(chǎn)生影響，對肉雞腸道黏膜的定量蛋白質(zhì)組學(xué)分析發(fā)現(xiàn)屎腸球菌與42種腸黏膜蛋白物質(zhì)代謝、免疫和抗氧化系統(tǒng)以及細(xì)胞結(jié)構(gòu)有關(guān)。

益生菌發(fā)揮益生作用的前提是黏附定植在腸道上皮中，并且其黏附定植具有宿主特異性，同源益生菌的飼用效果要優(yōu)于異源，細(xì)菌只能定植于同源動(dòng)物的消化道上皮細(xì)胞表面。所以想要獲得良好的動(dòng)物飼用的益生菌需要從動(dòng)物體內(nèi)分離和篩選。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種高粘附益生性屎腸球菌及其應(yīng)用。

為了實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的目的，本發(fā)明的屎腸球菌是從雞腸道混合菌中分離出，經(jīng)過菌落形態(tài)觀察、黏附及抑菌性能試驗(yàn)等獲得目標(biāo)菌株，經(jīng)16S rDNA基因序列分析，屎腸球菌16SrDNA擴(kuò)增電泳圖如圖1。將菌株屎腸球菌的16S rDNA的序列與GenBank中已知序列進(jìn)行Blast比對，從數(shù)據(jù)庫中獲得相關(guān)的種屬的16S rDNA，并通過菌種的細(xì)胞形態(tài)、生理生化特征和16S rDNA序列等實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)綜合確定該菌株屬于腸球菌屬，最終確定為厚壁菌門，桿菌綱，乳桿菌目，腸球菌科，腸球菌屬的屎腸球菌(Enterococcus faecium)。

該菌株黏附性能好，耐受性強(qiáng)，體外益生效果評價(jià)，該菌株為能夠抑制病原菌且具有益生和提高動(dòng)物的飼料利用率的效果，其16S rDNA序列如SEQ ID NO.1所示。該菌株已于2016年11月2日保藏在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(簡稱CGMCC，地址：北京市朝陽區(qū)北辰西路1號院3號，中國科學(xué)院微生物研究所，郵編100101)，分類命名為屎腸球菌(Enterococcus faecium)，保藏號為CGMCC No.13229。