[發明專利]一種抗腫瘤靶向給藥系統及其制備方法與應用

有效

• 申請號: 201611122608.7
• 申請日: 2016-12-08
• 公開（公告）號: CN108175759B
• 公開（公告）日: 2021-03-19
• 發明（設計）人: 陳小佳;王曉剛;洪岸
• 申請（專利權）人: 暨南大學
• 主分類號: A61K9/51
• 分類號: A61K9/51;A61K47/46;A61K9/127;A61K47/26;A61K31/7105;A61K31/713;A61K48/00;A61P35/00
• 代理公司: 廣州市華學知識產權代理有限公司 44245
• 代理人: 崔紅麗;陳燕嫻

本發明公開一種抗腫瘤靶向給藥系統及其制備方法與應用，屬于生物技術領域。該系統由小核酸藥物、包裹小核苷酸藥物的脂膜囊狀物及其靶向腫瘤細胞的靶頭組成，特別提供了靶頭是基于適配體AS1411，脂膜囊狀物為外泌體來共同組成的遞送let?7的給藥系統。本發明除了提供上述系統的制備方法，還提供了上述AS1411?exosome?let?7在細胞水平和小鼠在體水平的靶向性檢測結果和抗腫瘤的應用，結果說明采用AS1411?exosome，與單獨的exosome相比在細胞水平和小鼠體內均有更強的靶向性，而且可將let?7更有效的遞送到腫瘤組織中發揮抑制腫瘤增殖和遷移功能。

技術領域

本發明屬于生物技術領域，涉及一種藥物給藥系統，具體涉及一種抗腫瘤靶向給藥系統及其制備方法與應用。

背景技術

近年來，核酸藥物在人類重大疾病尤其是腫瘤治療的研究中顯示出了巨大潛力，為現代生物醫藥產業開辟了一個嶄新的方向。但是裸露的核酸藥物存在以下缺點：(1)核酸藥物在組織或細胞中易被核酶降解；(2)核酸藥物的細胞靶向能力較差；(3)核酸藥物自身帶有負電荷，與帶有負電荷的細胞膜之間存在排斥作用，導致其細胞內吞和逃逸內涵體的能力較差。以上缺點導致核酸藥物的治療效果不佳。因此，需要尋求合適的載體負載核酸藥物，將其遞送到靶細胞，有效逃離內涵體吞噬，釋放基因治療藥物進入細胞質，以實現該藥物的高效表達。所以目前核酸藥物治療領域中最大的瓶頸就是核酸藥物載體。

傳統的基因藥物主要依靠病毒載體運輸，但是病毒作為藥物載體，可能引起免疫反應、整合入基因組的隱患及病毒具有復活毒性的可能等所造成的系列安全問題一直飽受爭議。另有許多科學家利用納米粒子(LPNs)作為基因藥物載體，如陽離子脂質及脂質類似物或陽離子多聚體，例如多聚賴氨酸、多聚精氨酸、組蛋白、脫乙酰殼多糖、聚乙烯亞胺(PEI)等。但是脂質體給藥系統上存在缺乏靶向性、轉染率低和全身給藥的毒性等問題。因此其毒性和遞送藥物的脫靶效應等問題，限制了脂質體在體內的應用。此外，研究發現利用聚合物載體作為基因傳遞系統效率非常低，大多被陷在了細胞回收利用器—胞內體中，只有極少數核酸藥物可以被運到細胞質中發揮作用。Gaurav Sahay對納米顆粒運輸siRNA進入細胞質的效率進行了深入研究，發現大多數的siRNAs陷入到了細胞的胞吞回收通路中，一些隨后移動到溶酶體(lysosome)中被降解；而另一些則基本困在了內吞膜泡(endocyticvesicles)中，只有極少數的siRNA能夠達到細胞質發揮生物功能。因此，選擇一種具有高效性、靶向性和安全性非病毒基因藥物載體是基因治療領域中最主要、最關鍵的問題之一。

Exosome是由細胞內多胞體(multivesicular body，MVB)與細胞膜融合后釋放到細胞外基質的一種直徑約為30～120nm的小囊泡。大多數生物細胞都可以分泌這種小囊泡，并且它們天然存在于體液中，如血液、唾液、尿液和母乳等。無論是培養基中的exosome，還是各種器官分泌到體液中的exosome，都像貨車(cargo)一樣運載貨物然后穿梭于各種細胞參與細胞間通信、免疫反應的促進、抗原呈遞、程序性細胞死亡、血管生成、炎癥和凝血等。Exosome的蛋白質組學分析結果顯示，不同類型的細胞和體液(血液、乳汁和尿液)中，exosome膜上或泡內含有相同的標記蛋白分子，這些分子分別來自細胞質、質膜及高爾基體和內質網的生物膜。典型的exosome標記蛋白有：(1)四跨膜蛋白超家族，如CD9、CD63和CD81蛋白；(2)細胞質蛋白，如肌動蛋白(actin)、鈣磷脂結合蛋白(annexins)、Rab蛋白；(3)參與生物合成的分子，如凋亡連接基因2相互作用蛋白X(apoptosis-linked gene2-interacting protein X，ALIX)、腫瘤易感基因101的蛋白質(tumor susceptibilitygene101，TSG101)、熱休克蛋白(heat shock proteins，HSPs)70和熱休克蛋白90。