[發明專利]一種速生無刺槐組培苗的生根培養方法

有效

• 申請號: 201611119666.4
• 申請日: 2016-12-08
• 公開（公告）號: CN106613971B
• 公開（公告）日: 2019-08-16
• 發明（設計）人: 冒文娟;董舉文;李文劍;張玉杰;林大為;張承妹;蘇涌
• 申請（專利權）人: 上海杉一植物科技有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 上海精晟知識產權代理有限公司 31253
• 代理人: 丁清鵬

一種速生無刺槐組培苗的生根培養方法，包括：(1)實驗材料的選擇；(2)具體實驗步驟：(2.1)無菌外植體的獲取；(2.2)速生無刺槐繼代增殖步驟；(2.3)速生無刺槐生根培養步驟；(2.4)速生無刺槐繼代培養及生根培養條件；和(2.5)速生無刺槐組培苗的煉苗與移栽。本發明通過繼代增殖培養實現速生無刺槐的大規模生產，增殖系數高，平均增殖系數達到4以上；生根率高，最高可達95％；煉苗成活率高，平均為90％以上。

技術領域

本發明涉及一種植物組織培養的方法，具體涉及一種速生無刺槐組培苗的生根培養方法，屬于生物技術領域。

背景技術

速生無刺槐是人工選育出的一個刺槐優良無性系新品種，豆科刺槐屬落葉喬木，樹高可達30～35m。托葉刺小而軟，1～2年生樹有刺，3年生以后刺基本脫落。樹體高大，干型通直，生長迅速，年胸徑生長量為2.5～3.0cm，年樹高生長量2m以上。葉色濃綠，花白色，有香氣，花期5月。主要分布在北部暖溫帶落葉闊葉林區，分布的城市有沈陽、大連、北京、天津、石家莊、濟南、青島等。適應性強，抗寒、抗旱、耐瘠薄、耐鹽堿，是鹽堿地以及城市綠化的優良樹種。

速生無刺槐屬豆科刺槐屬樹種，有關無刺槐的研究尚處于起始階段，僅中國農業大學有一篇關于《無刺桅桿槐和無刺槐再生體系的研究》的報道，該文章主要是從葉片再生角度進行無刺槐的研究，主要目的是為了通過建立再生體系進行基因工程育種，文章中無刺桅桿槐和無刺槐的再生率人別為60％、50％，生根率分別為55.6％、72.2％，組培苗移栽成活率為85％。本專利主要目的是通過繼代增殖培養實現速生無刺槐的大規模生產，專利中速生無刺槐的增殖系數達到4以上，生根率達到95％以上，大棚煉苗移栽成活率達到90％以上，各項指標標準高，有利于速生無刺槐生產成本的降低，易于實現大規模的工廠化生產。

發明內容

本發明的目的在于，提供一種速生無刺槐組培苗的生根培養方法，以克服現有技術所存在的上述缺點和不足。

本發明所需要解決的技術問題，可以通過以下技術方案來實現：

一種速生無刺槐組培苗的生根培養方法，其特征在于，包括：

(1)實驗材料的選擇：

選取繼代周期為30～40天，生長健壯、葉片舒展，株高為3～5cm的速生無刺槐組培苗為實驗材料，切除基部愈傷及基部葉片，保留1cm左右的頂芽、莖段及芽團；

(2)具體實驗步驟：

(2.1)無菌外植體的獲取；

(2.2)速生無刺槐繼代增殖步驟；

(2.3)速生無刺槐生根培養步驟；

(2.4)速生無刺槐繼代培養及生根培養條件；

(2.5)速生無刺槐組培苗的煉苗與移栽。

其中，步驟(2.1)無菌外植體的獲取

選取1～2年生帶芽體的健壯根系埋于育苗基質中，待新芽萌發出來后切割成1～2cm長的頂芽或帶腋芽的莖段，剪去葉片留3～5mm葉柄，用75％酒精擦拭外植體表面，用洗衣粉水浸泡2min，再置于流水下沖洗0.5～1h；在超凈工作臺上，用0.05～0.1％的升汞處理10～15min，用無菌水沖洗5～6次，接種至誘導培養基中(MS+0.01～0.1mg/L 6-BA+30g/L糖+5～7g/L卡拉膠)，每瓶接種一株，獲得的無菌外植體的成功率為80％。

其中，步驟(2.2)速生無刺槐繼代增殖步驟：

(2.2.1)試驗材料

選取步驟1中誘導出來的芽直接進行增殖培養，所選材料生長健壯、葉片舒展，利用頂芽、莖段及芽團進行繁殖，其中頂芽高0.8～1.2cm左右、莖段高0.5～1cm左右含至少一個腋芽、芽團高0.5～1cm至少含兩個小芽；