[發明專利]一種培養CD19CAR-iNKT細胞方法及用途

有效

• 申請號: 201611116333.6
• 申請日: 2016-12-07
• 公開（公告）號: CN108165568B
• 公開（公告）日: 2020-12-08
• 發明（設計）人: 黃飛;何鳳;趙曉楠;金濤;王海鷹;史子嘯
• 申請（專利權）人: 上海恒潤達生生物科技有限公司
• 主分類號: C12N15/62
• 分類號: C12N15/62;C12N15/867;C12N5/10;C12N7/01;C07K19/00;A61K35/17;A61P35/00;A61P35/02
• 代理公司: 上海專利商標事務所有限公司 31100
• 代理人: 韋東

1.一種基因修飾的iNKT細胞或含該基因修飾的iNKT細胞的藥物組合物，其特征在于，所述細胞含有融合蛋白，所述融合蛋白包含依次連接的抗CD19單鏈抗體、人CD8α鉸鏈區、人CD8跨膜區、人41BB胞內區和人CD3ζ胞內區，

其中所述抗CD19單鏈抗體的輕鏈可變區的氨基酸序列如SEQ ID NO: 2第22-128位氨基酸所示，所述抗CD19單鏈抗體的重鏈可變區的氨基酸序列如SEQ ID NO:2第144-263位氨基酸所示，所述人CD8α鉸鏈區的氨基酸序列如SEQ ID NO:2第264-310位氨基酸所示；所述人CD8跨膜區的氨基酸序列如SEQ ID NO:2第311-332位氨基酸所示；所述人41BB胞內區的氨基酸序列如SEQ ID NO:2第333-380位氨基酸所示；所述人CD3ζ胞內區的氨基酸序列如SEQ ID NO:2第381-491位氨基酸所示。

2.如權利要求1所述的iNKT細胞或藥物組合物，其特征在于，所述融合蛋白在所述抗CD19單鏈抗體的N端還含有信號肽。

3.如權利要求2所述的iNKT細胞或藥物組合物，其特征在于，所述信號肽的氨基酸序列如SEQ ID NO:2第1-21位氨基酸所示。

4.一種基因修飾的iNKT細胞或含該基因修飾的iNKT細胞的藥物組合物，其特征在于，所述細胞含有多核苷酸，所述多核苷酸的序列含有（1）依次連接的抗CD19單鏈抗體的編碼序列、人CD8α鉸鏈區的編碼序列、人CD8跨膜區的編碼序列、人41BB胞內區的編碼序列和人CD3ζ胞內區的編碼序列，和/或（2）（1）所述序列的互補序列；

其中，所述抗CD19單鏈抗體的輕鏈可變區的氨基酸序列如SEQ ID NO:2第22-128位氨基酸所示，所述抗CD19單鏈抗體的重鏈可變區的氨基酸序列如SEQ ID NO:2第144-263位氨基酸所示，所述人CD8α鉸鏈區的氨基酸序列如SEQ ID NO:2第264-310位氨基酸所示；所述人CD8跨膜區的氨基酸序列如SEQ ID NO:2第311-332位氨基酸所示；所述人41BB胞內區的氨基酸序列如SEQ ID NO:2第333-380位氨基酸所示；所述人CD3ζ胞內區的氨基酸序列如SEQ ID NO:2第381-491位氨基酸所示。

5.如權利要求4所述的iNKT細胞或藥物組合物，其特征在于，所述多核苷酸在抗CD19單鏈抗體的編碼序列前還含有信號肽的編碼序列。

6.如權利要求5所述的iNKT細胞或藥物組合物，其特征在于，所述信號肽的氨基酸序列如SEQ ID NO:2第1-21位氨基酸所示。

7.如權利要求4所述的iNKT細胞或藥物組合物，其特征在于，

所述抗CD19單鏈抗體的輕鏈可變區的編碼序列如SEQ ID NO:1第64-384位核苷酸序列所示；所述抗CD19單鏈抗體的重鏈可變區的編碼序列如SEQ ID NO:1第430-789位核苷酸序列所示；所述人CD8α鉸鏈區的編碼序列如SEQ ID NO:1第790-930位核苷酸序列所示；所述人CD8跨膜區的編碼序列如SEQ ID NO:1第931-996位核苷酸序列所示；所述人41BB胞內區的編碼序列如SEQ ID NO:1第997-1140位核苷酸序列所示；所述人CD3ζ胞內區的編碼序列如SEQ ID NO:1第1141-1473位核苷酸序列所示。